皮肤衰老是内源性和外源性因素共同作用的结果,其中,氧化损伤是皮肤衰老的主要原因之一。氧化损伤不仅影响皮肤细胞的正常生长周期,而且会导致胶原蛋白等细胞外基质的降解和分泌减少。另外,过度刺激肌肉纤维,也会导致皮肤衰老最显著的标志—皱纹的形成。抗衰活性肽能够调节多种与皮肤衰老相关的生理进程,根据作用机制,可将其分为抗氧化肽、刺激胶原蛋白等基质合成的信号肽,以及神经递质抑制肽等。其中,肌肽（Carnosine）为人体内源性的活性肽,是一种理想的抗氧化剂,清除活性氧簇;棕榈酰三肽-5（Palmitoyl tripeptide-5）为信号肽,可上调相关细胞信号通路,刺激细胞基质蛋白的分泌;乙酰基六肽-3（Acetyl hexapeptide-3）为神经递质抑制肽,能够抑制儿茶酚胺等神经递质的释放,放松肌肉纤维,减轻皱纹。然而,活性肽难以透过皮肤角质层屏障进入皮肤抗衰靶部位和靶细胞,且稳定性差,易降解失活。同时,需要不同作用机制的活性肽协同作用才能实现理想的皮肤抗衰效果。本文构建了同时载负肌肽、棕榈酰三肽-5和乙酰基六肽-3的纳米脂质体（CPA-NLPs）,以实现三种活性肽的透皮共输送,有效增强活性肽的皮肤抗衰功效,同时,提高活性肽稳定性。对CPA-NLPs理化性质和体外释放进行了表征,研究了其在体皮肤渗透和皮肤细胞的摄取行为,进行了CPA-NLPs的体外抗氧化、抗衰老研究及人体皮肤抗衰功效评价。本文主要研究结果如下:（1）制备了共载负肌肽、棕榈酰三肽-5和乙酰基六肽-3的纳米脂质体CPA-NLPs,对其理化性质进行了表征。CPA-NLPs的平均粒径为62.4±1.2 nm,PDI为0.273±0.010,Zeta电位为-32.7±2.0 mV。肌肽、棕榈酰三肽-5和乙酰基六肽-3的载药量分别为7.60%、1.06%和0.74%,包封率分别为69.8%、92.3%和72.6%。稳定性测试结果显示CPA-NLPs显著提高了活性肽的热稳定性。活性肽在CPA-NLPs中呈稳定、缓慢的释放行为。大鼠在体皮肤渗透实验研究结果表明,CPA-NLPs能够显著促进活性肽的经皮渗透,进入皮肤深层组织。（2）细胞安全性实验研究结果表明,CPA-NLPs对人永生化角质形成细胞（HaCa T）和人成纤维细胞（HSF）均无毒性,安全性良好。研究了HSF细胞对包载FITC的纳米脂质体（FITC-NLPs）的摄取行为。结果显示,与游离FITC相比,纳米脂质体可以显著提升HSF细胞对FITC的摄取,表明纳米脂质体可有效促进载负的活性物入胞,提示纳米脂质体能够有效提高HSF细胞对活性肽的摄取,增强活性肽的抗衰功效。（3）对CPA-NLPs的体外抗氧化和细胞抗衰功效进行了研究。研究结果表明,CPA-NLPs能够保护HSF细胞免受H2O2诱导的氧化应激损伤,降低胞内的活性氧簇（ROS）的水平;同时,CPA-NLPs能够显著促进HSF细胞合成胶原蛋白I和透明质酸,明显抑制大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（PC12）分泌儿茶酚胺。因此,与游离活性肽比较,CPA-NLPs的体外抗氧化和细胞抗衰功效明显提高。（4）对CPA-NLPs的人体皮肤抗衰功效进行了评价。研究结果表明,与游离活性肽比较,CPA-NLPs能够更显著地降低受试者面部皱纹的数量、面积和面积比,提高皮肤弹性。以上研究结果表明,CPA-NLPs可改善活性肽稳定性,有效促进活性肽经皮渗透,提高细胞摄取量,实现了抗氧化、促胶原蛋白分泌以及抑制神经递质释放等多种抗衰机制活性肽的协同作用。研究工作为皮肤抗衰活性肽共输送纳米脂质体临床应用提供理论和实验依据。