尿中四氢呋喃的顶空—固相微萃取—气相色谱法测定方法研究

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目的四氢呋喃(tetrahydrofuran,THF)广泛应用于工业生产、医药等行业中,对职业接触四氢呋喃的工人身体具有一定的毒害作用。尿中四氢呋喃含量可以作为职业接触四氢呋喃的生物监测指标,国外已经制定了相关的职业接触生物限值和国家标准检验方法,而我国尚无相关的限值和国家标准检验方法。本研究旨在建立符合我国职业卫生标准制定指南要求的尿样中四氢呋喃的顶空-固相微萃取-气相色谱法的检测方法,为我国今后制定职业接触四氢呋喃生物监测限值和国家标准检测方法提供技术参考。方法用顶空-固相微萃取技术使尿样中的四氢呋喃经过水浴加热挥发,并吸附在固相微萃取纤维上,进行萃取、浓缩、富集,再用固相微萃取手柄直接进样到气相色谱仪中,解吸出固相微萃取纤维上的四氢呋喃,进行定性定量分析。通过对顶空-固相微萃取中萃取纤维、萃取时间、萃取温度、盐析剂等条件和气相色谱仪柱温的优化,研制尿样中四氢呋喃测定方法。采用保留时间定性,峰面积外标法定量的方法,同时对方法的检出限、测定范围、精密度、准确度、样品稳定性等指标进行实验研究。选择某药厂职业接触四氢呋喃的工作人员和非职业接触人员,采集尿样进行实验方法的应用。结果优化的测定条件结果:取5 ml尿样于顶空瓶中,加入2.50 g无水硫酸钠混匀,放入40℃的恒温水浴锅中,同时将固相微萃取手柄插入顶空瓶中,使萃取纤维暴露在顶空瓶中,对顶空瓶中的尿样进行顶空萃取,10 min后收回萃取纤维,取出固相微萃取手柄,立刻注入气相色谱仪进样口进行检测。气相色谱仪条件为:色谱柱是FFAP毛细管柱;检测器是氢火焰离子化检测器(FID);进样口温度是230℃;柱温是80℃;检测器温度是240℃;分流比是10:1;载气(N2)流量是40 ml/min。方法学性能指标:尿中四氢呋喃的检出限为0.0055 mg/L,测定范围为0.0182mg/L~4.4500 mg/L,线性回归方程为y=90.47x+4.46,相关系数r=0.9998,四氢呋喃的低、中、高三个浓度的平均加标回收率为92.6%~101.1%,日间精密度的相对标准偏差为7.62%~8.76%,日内精密度的相对标准偏差为6.29%~7.26%,样品稳定性好,在4℃的冰箱里能保存至少14天,待测物含量的损失率<10%。采集职业接触四氢呋喃工人班末尿用本方法进行检测,尿中四氢呋喃含量的范围为0.539 mg/L~1.887 mg/L,均未超过美国ACGIH制定的四氢呋喃的职业接触生物限值为班末尿2 mg/L。而对照组中的20人尿样中均未检出四氢呋喃。结论本研究建立了顶空-固相微萃取-气相色谱法测定尿中四氢呋喃的检测方法,简便快速,检出限低,结果准确可靠,满足我国生物材料测定方法的各项指标要求。通过现场应用表明该方法可行,可用于职业接触四氢呋喃人群尿中四氢呋喃的测定。
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