绒毛膜癌(绒癌)是一种来源于胚胎滋养细胞的恶性肿瘤,恶变的滋养细胞失去绒毛结构而侵蚀子宫肌层或转移至其他器官,造成破坏,以致病人死亡,具有高度恶性。尽管对于绒癌的病因和发病机理有许多学说,但其确切的发病机制仍不清楚。 同源异型盒基因DLX4是新近发现的转录因子。近年来的研究表明,它在多种肿瘤的发生发展中起重要作用。但其与绒癌发生的关系以及对绒癌细胞生物学行为影响的研究尚少。本课题从研究DLX4在各种绒癌细胞和正常胎盘组织中的表达入手,利用RNA干扰(RNAi)技术抑制了绒癌细胞株JEG-3中DLX4的表达,并运用western blot、RT-PCR、免疫组化、流式细胞检测、明胶酶谱、Matrigel体外侵袭实验、划痕实验等探讨它在绒癌细胞凋亡和侵袭过程中的作用。我们的实验结果提示DLX4在绒癌细胞中的异常表达是影响绒癌细胞凋亡和侵袭的重要因素之一。 本课题共分三部分:(1) DLX4在绒癌细胞株中的表达:(2) DLX4 RNA干扰诱导绒癌细胞的凋亡;(3) DLX4对绒癌细胞运动、侵袭能力的影响。 第一部分 DLX4在绒癌细胞株中的表达 目的 检测DLX4在人绒癌细胞株和正常绒毛、胎盘组织中的表达,探讨它与绒癌的关系。 方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测人绒癌细胞株JAr及JEG-3细胞中DLX4 mRNA的两种形式(isoforml和isoform2)的表达、Western blot检测DLX4蛋白的表达,并与30例正常早期妊娠绒毛和8例晚期妊娠胎盘组织进行对照。 结果 (1) DLX4基因mRNA的两种形式在绒毛、胎盘组织、JAr及JEG-3