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目的:
很多恶性肿瘤在生长转移的过程中,血管生成是促进肿瘤生长的一种因素,干扰素对肿瘤的浸润和生长有抑制作用,通过本实验来研究γ-干扰素对胆囊癌组织中VEGF表达影响的变化。
材料与方法:
一、细胞培养;
人胆囊癌细胞系(GBC-SD)生长于含有20%胎牛血清、100u/ml青霉素、100u/ml链霉素的RPMI1640细胞培养基中,置于含有5%CO2、37℃、饱和湿度的培养箱中进行培养。选择生长状态良好的细胞用于实验。
二、裸鼠负荷瘤的制备;
将GBC-SD接种于裸鼠的皮下,观察其成瘤情况,测量瘤体的长短径,当瘤体长径达到5mm以上时,认为负荷瘤制备成功。
三、给予处理因素;
将这些已经成瘤的裸鼠进行分组,分为实验组和对照组。分别给予实验组γ-干扰素,给予对照组生理盐水,均注射在负荷瘤部位,每周两次,连续给予三周,并对其瘤体和鼠的体重进行测量。
四、ELISA法检测胆囊癌组织中的VEGF浓度;
用颈椎脱位法猝死这些已经成瘤的裸鼠并取出其胆囊癌组织,测量瘤体的长短径,厚度和质量,并计算瘤体的体积。用匀浆器对进行匀浆,按照鼠VEGFELISA试剂盒的使用说明来检测其实验组和对照组的VEGF浓度。
五、统计学分析;
实验数据应用SPSS13.0统计软件包建立数据库,进行两样本t检验。P<0.05时,有显著性差异,P>0.05时,没有显著性差异。
结果:
实验组VEGF浓度低于对照组VEGF浓度,(P<0.05),有统计学意义,实验组体积及质量均略小于对照组,(P>O.05),无统计学意义。说明γ-干扰素能够抑制胆囊癌组织中的VEGF的表达。
结论:
IFN-γ对胆囊癌组织中血管的生成有抑制作用,从而推断IFN-γ可能会抑制肿瘤对其周围组织的浸润和转移生长。