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因高赖氨酸玉米有优良的食用和饲用效果及玉米产业在整个产业结构中的重要性,所以,加强我国高赖氨酸玉米育种,发展我国高赖氨酸玉米生产,对我国实施优质、高产、高效种植业、畜牧业和养殖业,对我国农牧业产业结构的调整,农牧业持续发展有着重大的实践意义和战略意义。
本研究采用分子标记辅助选择技术,通过连续三次回交转育将o2基因导入华玉四号的两个亲本自交系S7913和HZ85。在每个回交世代早期实行前景选择,对经过了前景选择的中选单株在中后期实行背景选择和表型选择。在背景选择和表型选择结果中,遗传背景恢复率较高的单株中选,它们与轮回亲本的回交后代进入下一轮选择。
在SCBC1F1群体中,用148对SSR引物对单侧连锁累赘控制在7.0cM的32个单株进行背景选择,平均的背景回复率为85.1%;其中,单侧连锁累赘控制在0.9cM的1个单株的背景回复率为88.9%。在HCBC1F1群体中,用146对SSR引物对单侧连锁累赘控制在7.0cM的19个单株进行背景选择,平均的背景回复率为84.2%;其中,单侧连锁累赘控制在2.8cM的1个单株的背景回复率为88.0%。
使用5个与o2基因连锁并已定位的SSR标记,在SCBC1F1与HCBC1F1群体中,对o2基因单侧的连锁累赘进行SSR分析。得到的结果与Ribaut(2002)的计算机模拟结果进行比较,发现,在标记辅助选择的回交育种程序中只考虑到最终中选的单株数Ni是不够的,还应该考虑到实际能够得到后代的中选单株数Nj,再结合预期要消除连锁累赘的大小来制定回交一代群体的大小。
在SCBC2F1群体和HCBC2F1群体中进行了表型选择,利用Bayes统计方法对实验数据进行了分析,并对其分析结果与标记的背景选择分析结果进行了比较。
2003年秋,对SCBC2F1群体和HCBC2F1群体中经过了前景选择的每个群体一个共两个中选单株进行了自交。2004年春,分别对两个分离群体SCBC2F2和HCBC2F2进行前景选择,目标基因型为o2o2的单株中选做自交,于2004年八月进行了赖氨酸含量分析。SCBC2F2群体中的中选单株的籽粒平均赖氨酸含量达到0.41%,而HCBC2F1群体中的中选单株的籽粒赖氨酸含量达到0.40%,均达到高赖氨酸玉米育种要求。
本研究还对选择的时期和策略进行了探讨。认为:一,在构建回交一代群体之前,要搜集尽可能多的非轮回亲本。二,去除连锁累赘和进行背景选择的最优世代在回交一代。三,进行PS的世代不宜在回交一代。四,背景选择中宜采取逐步筛选的策略。