一氧化碳释放分子CORM-2对小鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用研究

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目的探讨一氧化碳释放分子CORM-2减轻小鼠肾缺血再灌注损伤的作用及机制。方法以8-10周左右的雄性BALB/C小鼠为研究对象,建立小鼠肾脏原位缺血再灌注损伤模型,用血管钳夹闭左侧肾蒂,置于温度为31.5摄氏度的婴儿温箱中60分钟。然后立即松开血管夹,左肾恢复血流后切除右肾。小鼠随机分为3组:(1)对照组,术前1小时尾静脉注射入DMSO(1mL/Kg);(2)实验组:手术前1小时尾静脉注射溶有CORM-2的DMSO(10mg/kg);(3)假手术组,手术前一小时尾静脉注射入DMSO(1mL/Kg);术后24小时检测血肌酐(Cr)与尿素氮(BUN)值,并取对照组、实验组、假手术组肾脏标本行HE和PAS病理检查,以免疫组化检测肾组织内HO-1、MPO、TUNEL的表达情况。将小鼠肾脏缺血时间延长到80分钟以观察CORM-2对小鼠存活率的影响。结果:;对照组血肌酐和尿素氮分别是(102.21±42.15)μmol/L和( 56.69±15.46)mmol/L;实验组为(24.19±9.99)μmol/L和(9.29±4.74)mmol/L;假手术组为(18.85±10.24)μmol/L和(8.34±4.00)mmol/L。实验组肾功能(Cr与BUN)相对对照组显著改善(P<0.05)。PAS染色显示对照组肾小管上皮细胞大片坏死、细胞核消失、毛细血管淤血、管型形成;实验组有少量肾小管上皮细胞坏死,但数量较对照组明显减少。HE显示对照组大片肾小管弥漫性坏死,实验组肾小管上皮细胞坏死明显减少,大多数肾小管接近正常。免疫组化显示假手术组肾组织内HO-1表达极少,而实验组肾组织内呈阳性弥散性表达,对照组HO-1也有所表达,主要位于肾小管上皮细胞。免疫组化显示对照组肾组织内MPO在皮髓质大量表达,而实验组MPO表达明显减少。TUNEL显示对照组大量肾小管上皮细胞坏死崩解,皮髓质交界处及局部髓质区肾组织细胞浆大量凋亡小体,实验组凋亡细胞明显减少。小鼠存活实验显示CORM-2可以明显降低小鼠长时间缺血后再灌注损伤所致的高死亡率(P>0.05)。结论一氧化碳释放分子CORM-2释放CO入血,同时也可以诱导组织HO-1表达上调,通过抑制炎症细胞浸润、减少细胞凋亡,从而减轻肾小管上皮细胞的坏死,进而减轻肾脏缺血再灌注损伤。
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