寡糖作为膳食补充剂的营养成分引起了越来越多的关注。但是在寡糖生产过程中,单糖作为重要的副产物影响寡糖的生理活性,且因其具有与低聚糖相似的性质而难以分离。因此高效分离寡糖中的单糖对寡糖的生产具有重要意义。本课题针对单糖与寡糖具有相似性质难以分离的问题,通过脂肪酶底物特异性,选择性的将单糖酯化而不酯化寡糖,生成的糖酯与寡糖性质差异大而将两者分离。以滤纸为模型开发了一条从寡糖中分离单糖的工艺路线。在此过程中,寡糖中过多的葡萄糖被转化为葡萄糖癸酸单酯,在可生物降解的非离子表面活性剂应用中具有重要的研究价值,并且实现了纤维寡糖的高效纯化。首先,对以离子液体、稀硫酸、纤维素酶为催化剂水解纤维素制备纤维寡糖的效果进行了探究。结果显示纤维素酶的水解效果较好。在此基础上,探究了纤维素酶添加量、反应温度及反应器转速对纤维寡糖生成率的影响。在添加0.6 wt%纤维素酶、50℃、200 rpm的最优条件下,纤维寡糖的产量达到33%。其次,将纤维素酶水解产物进行冷冻干燥,并以干燥的水解产物和癸酸为底物,在有机溶剂中以脂肪酶为催化剂将单糖酯化为糖酯并对产物进行了结构鉴定。实验中分别对脂肪酶种类、溶剂种类、温度和底物摩尔比等因素进行了探讨及优化。最后,以木质纤维素为原料,对生物酶酯化制备纤维寡糖和葡萄糖癸酸单酯的工艺进行开发。采用3种天然木质纤维素(柳枝草、玉米秸秆和芦苇)进行验证,经过预处理、纤维素酶水解以及两次酯化之后,最终可得到36.3%(柳枝稷)、33.1%(芦苇)和31.4%(玉米秸秆)的纤维寡糖以及22%左右的糖酯。结果表明该工艺对天然木质纤维素也具有良好的适用性。