透明颤菌血红蛋白基因在枯草杆菌中的克隆和表达

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革兰氏阴性菌透明颤菌(Vitreoscilla)的血红蛋白与氧结合能力强,能降低该菌生长的需氧量,是一种氧结合,氧调节蛋白.该实验室成功地用阳性菌β--内酰胺酶基因bla的启动子和透明颤菌血红蛋白VHb的结构基因vgb构建了一个枯草杆菌的血红蛋白的基因表达质粒pAV,并在枯草杆菌中表达.采用PCR扩增以及DNA重组技术等方法构建了一个pUC19-5质粒,并转化到大肠杆菌DH5α中,获得亚克隆菌株.将SacB基因启动子和vgb基因连接片段重组到穿梭质粒pAK4-1,获得pASV质粒.将pASV通过转化,细胞融合等方法转入一枯草杆菌DB104和B.S53中,通过CO发泡法制测得其表达量并分析,利用酶活测定法测定它对木聚糖酶表达量的影响.
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