【摘 要】
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该实验是在国内外研究的基础上,应用大片段缺失方法和USE定点诱变技术深入的探讨WD基因不同功能区对ATP7B蛋白铜离子转运功能的影响,内容包括:1.克隆全长片断的ATP7B基因,构
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该实验是在国内外研究的基础上,应用大片段缺失方法和USE定点诱变技术深入的探讨WD基因不同功能区对ATP7B蛋白铜离子转运功能的影响,内容包括:1.克隆全长片断的ATP7B基因,构建其哺乳动物表达载体,为Wilson病的基因治疗奠定基础.2.应用高保真长片断PCR和质粒重组技术构建ATP7B基因不同功能区缺失突变体,研究不同的功能区对铜离子研究的影响,以期确定发生于该部位的基因突变是致病性突变还是基因的多态性.3.应用单一酶切位点消除定点诱变技术构建5-6铜离子结合区CXXC保守序列及ATP酶功能区LLL结构定点诱变体,以期探讨Wilson病的铜离子转运过程,研究基因突变导致蛋白表达及功能异常的分子生物学机制.
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