重组人促红细胞生成素对白血病细胞增殖的影响

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiao_zhuang_lin
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目的:检测重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)对白血病细胞增殖的影响,为临床应用rhEPO治疗白血病继发贫血提供一定的实验依据。方法:病例来源于2006年10月26日至2007年1月30日山西省人民医院及山西医科大学附属第二医院门诊及住院初治、未缓解及复发急性白血病(acute leukemia,AL)患者(白血病细胞>50%并排除M6)30例,均经骨髓穿刺检查、免疫分型、染色体及融合基因检查确诊。其中男15例,女15例,年龄5—63岁,平均年龄29±17岁,包括急性髓细胞性白血病(acute myelogenous leukemia,AML)21例,急性淋巴细胞性白血病(acutelymphocytic leukemia,ALL)9例。①用EDTA抗凝管抽取骨髓或外周血2ml后沿管壁摇匀。用淋巴细胞分离液分离单个核细胞(MNC),提取单个核细胞,吸取核细胞层,D-Hank’s液洗涤两遍,加红细胞裂解液去除单个核细胞中红细胞。加RPMI 1640培养液配制成1X106/L终浓度的MNC悬液,形态学观察并计数;②将细胞接种于24孔培养板,根据预实验结果,按实验设计每孔分别加入10u、20u rhEPO,不加药组作为空白对照,放置于37℃,5%CO2培养箱中培养,分别于24h、72h收集细胞。③取不同时间培养的细胞悬液500μl,1000r/min离心5min,弃上清,混匀细胞取20μl涂片,进行形态学观察并计数;采用流式细胞仪检测不同浓度rhEPO体外对白血病细胞作用后,在不同时间(24h、72h)CD71的表达及对细胞周期的影响。结果:30例急性白血病患者骨髓细胞分别给予10u、20u rhEPO,经24h、72h培养,倒置显微镜下观察细胞形态无明显变化,各组间细胞计数无显著差异,P>0.05;30例患者均有CD71抗原的表达,不同浓度、不同时间比较无显著差异,P>0.05。AML与ALL组间比较CD71抗原表达无显著差异,P>0.05;S期细胞百分率不同浓度、不同时间比较无明显差异,P>0.05;AML与ALL组间比较S期细胞无明显差异,P>0.05。结论:急性白血病患者均有CD71抗原的表达,用不同浓度rhEPO在不同时间对AML与ALL患者细胞形态、计数、CD71抗原的表达及S期细胞百分率无显著差异。本实验研究表明rhEPO对体外白血病细胞可能无明显增殖作用。
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