猪皮胶原蛋白的提取及其与壳聚糖共混性能研究

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本文利用胃蛋白酶在酸性条件下从猪皮中提取胶原蛋白,并研究不同去乙酰度壳聚糖与胶原蛋白共混样品的性能。采用正十二烷基磺酸钠(SDS)-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)对胶原蛋白样品进行分析,并估算其相对分子质量。利用紫外可见分析对所提取胶原蛋白定性分析。用傅立叶红外(FFIR)胶原蛋白,示差量热扫描仪(DSC),乌氏(Ubbelohde)黏度计对聚糖与胶原蛋白共混样品的相容性,生物活性进行了详细的探讨。并参照AATCC方法对共混样品的抑菌性能进行探讨,并讨论壳聚糖不同去乙酰度及浓度对抑菌率的影响。 电泳结果证明,所提取的胶原蛋白为I型具有完整的生物活性的胶原蛋白,并估算其相对分子质量为320 kD。特性粘度测试表明,壳聚糖溶液的[η]m值随壳聚糖去乙酰度的增加而逐渐增加,四种去乙酰度壳聚糖溶液的[η]m均明显比胶原蛋白溶液的[η]m大,而且壳聚糖/胶原蛋白共混溶液的[η]m值随着壳聚糖含量的增加而增加。而根据不同去乙酰度的壳聚糖/胶原蛋白共混溶液的b12值均明显大于b12i,则可说明胶原蛋白与壳聚糖具有相容性。胶原蛋白与不同去乙酰度的壳聚糖共混之后,FTIR分析表明,胶原蛋白的变性程度随壳聚糖含量的增加而增加,即生物活性随壳聚糖含量增加而降低。DSC分析表明,胶原蛋白/壳聚糖共混样品的变性温度(TD)随其内壳聚糖含量由0%逐渐增加到20%时先降低,之后随壳聚糖含量增加至40%时其TD值陡然升高至较对应纯壳聚糖分子之变性温度更高之数值;但当壳聚糖含量大于40%时,随着壳聚糖含量增加,其TD值反而明显下降然后再逐步上升至接近壳聚糖分子之变性温度。 抑菌性能研究表明,壳聚糖溶液的最小有效抑菌浓度是0.03 wt%,且壳聚糖的浓度和乙酰度越高,对金黄色葡萄球菌的抑菌效果越好。而壳聚糖/胶原蛋白共混溶液的抑菌率随着壳聚糖含量的增加而增加,相同壳聚糖浓度下,抑菌率随着壳聚糖去乙酰度增加而增加。
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