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第一部分Cdc42在颞叶癫痫动物模型中的表达研究目的：研究Cdc42在氯化锂-匹罗卡品点燃的癫痫模型大鼠海马脑组织中的表达规律及其表达部位。方法:1、成年雄性SD大鼠48只，随机分成1个对照组（n=8）和5个模型组（亚组：1天，3天，7天，30天和60天；各组n=8），腹腔注射氯化锂-匹罗卡品构建点燃颞叶癫痫动物模型。2、用免疫荧光双标，免疫组化及Western blot技术检测Cdc42在点燃后不同时间点海马脑组织中的表达部位及规律。结果：1、免疫荧光双标检测Cdc42的表达部位：点燃后大鼠海马神经元胞浆和胞膜中Cdc42均有表达，在神经胶质细胞中不表达。2、免疫组化检测Cdc42的表达水平：在对照组中，可以观察到Cdc42在神经元胞浆和胞膜上有轻度表达，在模型组中，可以观察到在点燃后第1天，第3天，第30天和第60天表达明显增强（P<0.05），主要在海马CA1区、CA3区和DG区的神经元胞浆和胞膜中表达。3、Western blot检测Cdc42的表达规律：从第1天开始到第60天Cdc42在模型组中的表达均较对照组明显升高（P<0.05），在第3天表达达到高峰。结论：在颞叶癫痫动物模型中Cdc42表达增高，这些变化可能参与了癫痫的发生和发展过程。第二部分Cdc42特异性抑制剂ML141对大鼠痫性发作的影响目的：通过海马立体定位对大鼠注射Cdc42特异性抑制剂ML141，观察Cdc42对大鼠痫性发作的影响。方法:成年雄性健康SD大鼠54只，随机分成1个对照组（n=9），1个vehicle组（n=9）和4个ML141组（亚组：ML1413umol组，ML14110umol组，ML14120umol组和ML14150umol组，各组n=9），各组应用海马立体定位仪对大鼠海马注射相应药物后，腹腔注射氯化锂-匹罗卡品建模，观察各组大鼠行为学变化。结果：1、大鼠痫性发作潜伏期观察：大鼠腹腔注射匹罗卡品后开始观察行为学变化，发作潜伏期结果显示：正常组（22.22±8.57min），vehicle组（23.53±8.17min）和ML1413umol组（28.09±10.36），三组平均发作潜伏期比较无明显改变，差异无统计学意义（P>0.05）；ML14110umol组（33.54±11.54）平均发作潜伏期较正常组和vehicle组延长，但差异无统计学意义（P>0.05）；ML14120umol组（42.34±13.09min）和ML14150umol组（66.68±8.37min）平均潜伏期较正常组和vehicle组明显延长，且差异有统计学意义（P<0.05）。2、大鼠痫性发作Racine评分观察：正常组，vehicle组和ML14150umol组大鼠腹腔注射匹罗卡品10分钟，20分钟和30分钟后，观察大鼠痫性发作Racine评分结果显示：10分钟时正常组（3.00±0.71），vehicle组（3.33±0.71）和ML14150umol组（0.56±0.53）；20分钟时正常组（4.00±0.87），vehicle组（4.22±0.83）和ML14150umol组（1.00±0.82）；30分钟时正常组（4.89±0.33），vehicle组（4.89±0.33）和ML14150umol组（1.78±0.97），三组中正常组和vehicle组大鼠痫性发作Racine评分无明显变化，且差异无统计学意义（P>0.05），ML14150umol组与正常组和vehicle组比较，Racine评分明显降低，且差异有统计学意义（P<0.05）。结论：有效剂量的Cdc42特异性抑制剂ML141干预后可明显延长匹罗卡品诱发后大鼠痫性发作的潜伏期和降低其发作程度。第三部分Cdc42在大鼠痫性发作中的机制研究目的：研究Cdc42对氯化锂-匹罗卡品点燃的癫痫模型大鼠海马神经元痫性放电的影响。方法:应用全细胞膜片钳技术检测对照组，造模组和ML141组（氯化锂-匹罗卡品点燃后大鼠取脑片离体灌流3umol ML141）大鼠海马脑片神经元放电情况：动作电位（APs），微小的兴奋性突触后电流（mEPSCs），微小的抑制性突触后电流（mIPSCs）和诱发的抑制性突触后电流（eIPSCs）。结果：1、ML141对APs的影响：与对照组比较，造模组的自发性动作电位频率明显增高，且有统计学差异（P<0.05）；与造模组比较，ML141组的自发性动作电位频率明显减少，且有统计学意义（P<0.05）；与对照组比较，ML141组的自发性动作电位频率无明显变化，且无统计学意义（P>0.05）。2、ML141对mEPSCs的影响：（1）幅度：与对照组比较，造模组mEPSCs的幅度明显增加，KS统计差异有统计学意义（P<0.05）；与造模组比较，ML141组mEPSCs的幅度无明显变化，KS统计无统计学意义（P>0.05）。（2）频率：与造模组相比，对照组mEPSCs的频率明显低于造模组（P<0.05），ML141组mEPSCs的频率无明显变化，且无统计学意义（P>0.05）。3、ML141对mIPSCs的影响：（1）频率：与造模组相比，对照组和ML141组mIPSCs的频率明显高于造模组（P<0.05）。（2）幅度：与造模组相比，对照组和ML141组mIPSCs的幅度均增加，KS统计差异有统计学意义（P<0.05）。4、ML141对eIPSCs的影响：统计各组GABAA受体介导的抑制性突触后电流幅度发现，造模组eIPSCs幅度较正常组明显降低（P<0.05），ML141组与造模组比较，eIPSCs幅度明显增高（P<0.05）。结论：1、有效剂量的ML141干预可降低匹罗卡品诱导的大鼠海马脑片神经细胞自发性动作电位的频率；2、有效剂量的ML141干预对匹罗卡品诱导的大鼠海马脑片神经细胞mEPSCs的频率和幅度无明显作用；3、有效剂量的ML141干预可增加匹罗卡品诱导的大鼠海马脑片神经细胞mIPSCs的频率和幅度；4、有效剂量的ML141干预可增加匹罗卡品诱导的大鼠海马脑片神经元细胞eIPSCs的幅度。