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本试验以小鼠为实验动物,采用腹腔注射大肠杆菌107/86肉汤菌液和尾静脉注射志贺样毒素Ⅱ型变异体(SLT-Ⅱe)的方法,复制出仔猪水肿病的病理模型,在此基础上进行了不同中药方剂的治疗试验,筛选出了治疗仔猪水肿病的有效方剂一五皮饮,进而进行了五皮饮对仔猪水肿病模型小鼠的疗效观察试验,测定了治疗前后不同时间小鼠血清中一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量变化,以对五皮饮治疗作用的机理进行初步探讨。
结果表明:1.分别按8×1010、4×1010、8×109、4×109和2×109个细菌的剂量给小鼠腹腔注射大肠杆菌107/86肉汤菌液,均可以引起小鼠发病,前三个剂量组的小鼠在攻毒后24-96h内全部死亡,第四个剂量组攻毒后共有3只小鼠死亡,第五个剂量组在攻毒后小鼠出现轻微症状,无死亡情况。在分别按0.1、0.05、0.02和0.01ml/只的剂量给小鼠尾静脉注射志贺样毒素Ⅱ型变异体(SLT-Ⅱe)后,前两个剂量组于攻毒后24h小鼠全部死亡,第三个剂量组在48h内有4只小鼠死亡,其余逐渐恢复,第四个剂量组小鼠无死亡情况,仅出现轻微的临床症状。所有发病及死亡小鼠的临床症状、剖检病变、显微病变以及超微病变,均与自然发病仔猪的临床症状和病理变化相一致,说明腹腔注射107/86肉汤菌液或尾静脉注射SLT-Ⅱe均可成功地复制出小鼠仔猪水肿病模型。两种方法相比,注射SLT-Ⅱe复制出的模型病程短,死亡快,临床症状不明显,不适合用于治疗研究。107/86肉汤菌液较为理想的注射剂量为4×109个细菌。
2.在小鼠仔猪水肿病模型的基础上,进行了治疗本病的中药方剂筛选试验,结果表明相对于试验中所用的其它方剂,五皮饮对本病有显著的治疗效果,确定五皮饮为治疗仔猪水肿病的有效方剂。
3.五皮饮对仔猪水肿病模型小鼠的治疗试验发现,在攻毒出现症状后开始给予剂量为0.2ml/10g的五皮饮水煎液,可以有效地减轻小鼠的临床症状并保护小鼠免于死亡,其治愈率为73%,与攻毒对照组相比均有极显著差异(P<0.01),说明五皮饮对仔猪水肿病具有显著的治疗效果。
4.对攻毒前后小鼠血清中NO和TNF-α含量的测定发现,攻毒后小鼠血清中的NO和TNF-α含量极显著地升高,说明二者在仔猪水肿病的发生过程中起着重要作用。在用五皮饮治疗后,二者的水平显著降低,表明通过对NO和TNF-α含量的调节以改变血管的通透性,是五皮饮治疗仔猪水肿病的机理之一。