论文部分内容阅读
目的:1.建立可用于进一步实验的脾气虚弱糖尿病心肌病(DCM)大鼠模型;2.通过研究葛根及其配伍对脾气虚弱DCM大鼠线粒体超微结构、线粒体跨膜电位、心肌ATP浓度的干预作用,探讨葛根及其配伍对脾气虚弱DCM大鼠心肌线粒体结构及功能的影响,确定中医治疗DCM的作用机制,筛选出DCM治疗的有效方剂。
方法:1.实验一:选取8周龄SPF级雄性SD大鼠90只,随机分为空白组、模型组,模型组大鼠采用饥饱失常法,以单日禁食,双日高糖高脂饲料隔日喂养持续8周,并于高糖高脂饲料喂养第4周,于大鼠腹腔一次性注射链脲佐菌素(STZ)50mg/kg,建立脾气虚弱DCM大鼠模型。模型制备后检测模型大鼠血糖、体重,并观察大鼠一般状态,使用ELISA法检测大鼠肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB),同时通过心肌细胞HE染色,观察大鼠心肌细胞变化。
2.实验二:将实验一空白组大鼠8只,作为实验二空白组,并将造模成功大鼠,分为模型组、达美康组、葛根组、葛芪组、葛参组、葛蒌组、葛芪参蒌组各8只,分别给予各组大鼠生理盐水或药物进行灌胃,9周后检测各组大鼠血糖、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG),通过透射电镜观察大鼠心肌线粒体超微结构,以流式细胞仪检测大鼠心肌线粒体跨膜电位,使用ELISA法检测大鼠心肌ATP浓度。
结果:1.采用单日禁食,双日高糖高脂饲料喂养,结合腹腔STZ注射后的SD大鼠与空白组大鼠相比,血糖、TC、TG值均显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05),模型组体重则较空白组显著降低(P<0.01),且模型组大鼠背部皮毛出现青色瘀斑,鼠尾颜色成青灰色,粪便时软时稀,并有蜷缩聚堆、眯眼、弓背现象发生,同时心肌细胞发生肿胀、萎缩现象,部分细胞排布不整齐,细胞核大小不均,部分细胞核聚集,肌纤维间距增宽,有断裂、溶解现象发生。
2.药物干预后,各药物干预组SD大鼠血糖值与模型组比较,均有显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05),且葛芪组、葛芪参蒌组血糖值明显低于其余中药干预组,差异显著(P<0.05)。
3.药物干预后,各药物干预组SD大鼠TC、TG值较模型组,降低明显,差异具有统计学意义(P<0.05),且葛芪参蒌组作用优于其余各组。
4.药物干预后,各药物干预组SD大鼠心肌线粒体超微结构、心肌线粒体跨膜电位均有所改善,其中以葛芪参蒌组效果最优。
5.药物干预后,各药物干预组SD大鼠心肌ATP浓度均较模型组有所升高,差异明显(P<0.05),其中葛芪参蒌组作用优于其余各药物干预组,差异明显(P<0.05)。
结论:1.通过单日禁食,双日喂养高糖高脂饲料,并结合STZ腹腔注射,可有效制备脾气虚弱DCM大鼠模型。
2.葛根及其配伍可有效降低脾气虚弱DCM大鼠血糖、TC、TG值,改善心肌线粒体超微结构、心肌线粒体跨膜电位,提高心肌ATP浓度,其中,综合各指标检测结果来看,以葛芪参蒌组效果最优。
3.DCM发病与线粒体结构及功能损伤关系密切,中医可能通过恢复线粒体结构及功能,进而达到对DCM的治疗作用。
方法:1.实验一:选取8周龄SPF级雄性SD大鼠90只,随机分为空白组、模型组,模型组大鼠采用饥饱失常法,以单日禁食,双日高糖高脂饲料隔日喂养持续8周,并于高糖高脂饲料喂养第4周,于大鼠腹腔一次性注射链脲佐菌素(STZ)50mg/kg,建立脾气虚弱DCM大鼠模型。模型制备后检测模型大鼠血糖、体重,并观察大鼠一般状态,使用ELISA法检测大鼠肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB),同时通过心肌细胞HE染色,观察大鼠心肌细胞变化。
2.实验二:将实验一空白组大鼠8只,作为实验二空白组,并将造模成功大鼠,分为模型组、达美康组、葛根组、葛芪组、葛参组、葛蒌组、葛芪参蒌组各8只,分别给予各组大鼠生理盐水或药物进行灌胃,9周后检测各组大鼠血糖、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG),通过透射电镜观察大鼠心肌线粒体超微结构,以流式细胞仪检测大鼠心肌线粒体跨膜电位,使用ELISA法检测大鼠心肌ATP浓度。
结果:1.采用单日禁食,双日高糖高脂饲料喂养,结合腹腔STZ注射后的SD大鼠与空白组大鼠相比,血糖、TC、TG值均显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05),模型组体重则较空白组显著降低(P<0.01),且模型组大鼠背部皮毛出现青色瘀斑,鼠尾颜色成青灰色,粪便时软时稀,并有蜷缩聚堆、眯眼、弓背现象发生,同时心肌细胞发生肿胀、萎缩现象,部分细胞排布不整齐,细胞核大小不均,部分细胞核聚集,肌纤维间距增宽,有断裂、溶解现象发生。
2.药物干预后,各药物干预组SD大鼠血糖值与模型组比较,均有显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05),且葛芪组、葛芪参蒌组血糖值明显低于其余中药干预组,差异显著(P<0.05)。
3.药物干预后,各药物干预组SD大鼠TC、TG值较模型组,降低明显,差异具有统计学意义(P<0.05),且葛芪参蒌组作用优于其余各组。
4.药物干预后,各药物干预组SD大鼠心肌线粒体超微结构、心肌线粒体跨膜电位均有所改善,其中以葛芪参蒌组效果最优。
5.药物干预后,各药物干预组SD大鼠心肌ATP浓度均较模型组有所升高,差异明显(P<0.05),其中葛芪参蒌组作用优于其余各药物干预组,差异明显(P<0.05)。
结论:1.通过单日禁食,双日喂养高糖高脂饲料,并结合STZ腹腔注射,可有效制备脾气虚弱DCM大鼠模型。
2.葛根及其配伍可有效降低脾气虚弱DCM大鼠血糖、TC、TG值,改善心肌线粒体超微结构、心肌线粒体跨膜电位,提高心肌ATP浓度,其中,综合各指标检测结果来看,以葛芪参蒌组效果最优。
3.DCM发病与线粒体结构及功能损伤关系密切,中医可能通过恢复线粒体结构及功能,进而达到对DCM的治疗作用。