论文部分内容阅读
目的:应用多参数流式细胞术(FCM)，结合患者初诊免疫分型确定抗体组合，加用抗原跨系表达或抗原不同步表达相结合的抗体组合检测白血病微小残留病(MRD)，为临床寻找和建立特异性好、敏感度高、临床应用方便的MRD检测方法，并初步探讨其临床价值。方法:1.采用多参数流式细胞术，CD45/SSC设门，以非白血病患儿为对照，探讨CD45/CD19/CD10/CD34抗体组合检测MRD的有效性；2.根据初诊异常免疫表型特点确定一到两组四色抗体，加用抗原跨系表达抗体组合CD45/CD19/CD10/CD13或抗原不同步表达相结合的抗体组合CD45/CD19/CD22/CD34，对20例完全缓解后的急性B淋巴细胞白血病患儿进行MRD的定期检测(分别在诱导治疗结束时和连续化疗3个月、6个月、12个月各时间点进行检测)。结果:1.20例B-ALL患儿中，90％患儿初诊时存在CD45、CD34、CD19、CD10表达量的异常。差异有统计学意义(P<0.05)。2.CD45/CD19/CD10/CD34、CD45/CD19/CD10/CD13、CD45/CD19/CD22/CD34三组抗体组合发生频率最高，分别为40％、35％和30％。3.用CD45/CD19/CD10/CD34、CD45/CD19/CD10/CD13、CD45/CD19/CD22/CD34三组抗体组合对2例无初诊免疫分型患儿进行MRD检测，其中1例在诱导缓解结束时检测到MRD，MRD值为0.15％，并在随访5个月后骨髓复发，另1例MRD阴性患儿持续缓解20个月。4.在按初诊年龄、性别、白细胞计数、髓系抗原表达、细胞遗传学特征(染色体数目＜45的低二倍体)、泼尼松反应等因素分别分组中，各组完全缓解时MRD的检出率均无差别。5.诱导缓解结束时MRD(+)组8例中有4例复发，无事件生存时间4-20个月，MRD(-)组无1例复发，无事件生存间期10-24个月，组间比较差异有统计学意义(P＜0.05)。不同水平阳性MRD分组，MRD≥0.1％组和0.01％≤MRD＜0.1％组比较，差异无统计学意义(p＞0.05)。6.在诱导缓解治疗结束及连续化疗3、6、12个月时MRD与无事件生存间期，各组间比较差异有统计学意义(P＜0.05)。结论:1.CD45/SSC设门，CD45/CDl9/CD10/CD34可作为B-ALL患儿MRD检测的有效抗体组合。2.根据B-ALL患儿初诊异常免疫表型特点，确定一至两组四色抗体组合，再加用抗原跨系表达抗体组合或抗原不同步表达相结合的抗体组合，用于检测MRD，既能使检测个体化，又可减少检测的假阴性。3.CD45/CD19/CD10/CD34、CD45/CD19/CD22/CD34、CD45/CD19/CD10/CD13三组抗体组合有互相协同、互补作用，可用于无初诊免疫分型患儿的MRD检测。4.B-ALL患儿治疗初期MRD的存在是独立的不良预后因素。5.FCM检测MRD可作为儿童B-ALL缓解的一个新的免疫学指标。以诱导缓解结束时骨髓中MRD＜0.01％为免疫学缓解的标准。6.MRD动态监测，在所有的时间点上，MRD水平≥0.01％的患儿预后较差。