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目的：研究氨基甾体H42389对K562细胞系及CML细胞的增殖及分化作用,探讨氨基甾体H42389对慢性髓性白血病细胞Ras癌基因相关蛋白的抑制作用。方法：通过细胞培养实验、集落培养实验、MTT实验观察氨基甾体H42389对K562及CML细胞抑制增殖作用；采用Wright染色,联苯胺染色,NBT染色和流式细胞术观察K562和CML细胞功能变化,评价氨基甾体H42389对K562和CML细胞的诱导分化作用；通过荧光分光光度计检测氨基甾体H42389作用于K562和CML细胞30分钟后胞内游离钙离子浓度的变化；通过Realtime-PCR检测氨基甾体H42389对K562和CML细胞钙通道蛋白mRNA表达的影响。结果：1.氨基甾体H42389对K562细胞和CML细胞增殖的影响。将氨基甾体H42389按设定浓度加入到K562和CML细胞中,经5天孵育,可以观察到：随着药物浓度的加大,细胞增殖抑制程度加重,细胞MTT的A492值有明显的下降趋势。2.H42389对K562细胞和CML细胞分化的影响。K562和CML细胞培养5d后,Wright染色,光镜下经氨基甾体H42389处理后的细胞与对照组比可见细胞体积变大,核浆比例减少,表现一定程度的分化。K562细胞内血红蛋白联苯胺染色显示,氨基甾体H42389作用5天后,联苯胺染色的A492值随着药物浓度的升高而增高；CML细胞NBT染色A492值在一定药物浓度(10-6mol/L～10-9mol/L)下呈现出剂量依赖关系。流式细胞仪分析显示,10-6mol/L的氨基甾体H42389作用于K562细胞4天后,细胞膜上CD71表面标记表达阳性率为79%；作用于CML细胞4天后,细胞膜上CD14表面标记表达阳性率为77%。3.氨基甾体H42389抑制K562细胞和CML细胞的增殖和诱导其分化作用的机制研究。(1)氨基甾体H42389对K562和CML细胞内游离[Ca2+]i的影响。10-6mol/L的H42389处理已用Fura-2/AM负载过的K562和CML细胞,孵育后上机检查结果显示,K562细胞对照组的荧光值是176.30±1.62,处理组为114.88±1.73；CML细胞对照组的荧光值是184.03±1.52,处理组为112.90±0.91。表明经药物处理后的K562和CML细胞内游离[Ca2+]i明显低于对照组。(2)Realtime-PCR检测氨基甾体H42389作用后K562和CML细胞钙通道蛋白mRNA的表达量变化。处理组和对照组K56细胞钙通道nRNA相对含量分别是2.45×10-3、5.59×10-3,结果说明H42389作用K562细胞后可明显下调钙通道mRNA;处理组和对照组CML细胞钙通道mRNA相对含量分别是2.24×10-3、5.74×10-3,结果说明H42389作用CML细胞后可明显下调钙通道mRNA;(3)Realtime-PCR检测氨基甾体H42389作用后K562和CML细胞TC10mRNA的表达量变化。处理组和对照组K56细胞TC10mRNA相对含量分别是2.17×10-2、6.65×10-2,结果说明H42389作用K562细胞后可明显下调TC10mRNA;处理组和对照组CML细胞钙通道mRNA相对含量分别是2.22×10-3、6.71×10-2,结果说明H42389作用CML细胞后可明显下调TC10mRNA;结论1.氨基甾体H42389能明显抑制K562细胞以及CML细胞的生长增殖,在一定药物浓度范围内呈现出浓度依赖关系。2.氨基甾体H42389能够明显诱导K562细胞向红系分化成熟以及诱导CML细胞向单核巨噬系分化成熟。3.氨基甾体H42389可使K562细胞以及CML细胞内游离钙含量显著下降。4.氨基甾体H42389具有促进有效下调K562细胞以及CML细胞钙通道蛋白mRNA表达的能力。5.氨基甾体H42389具有有效下调K562细胞以及CML细胞Ras癌基因相关蛋白TC10mRNA表达的能力。