新型核酸适配体电化学传感器研究

来源 :烟台大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liwuyi
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
近年来,食品安全事件日益频发,不断地给人们带来新的挑战。因此,食品分析领域的研究课题成为大众普遍关注地热点之一。传统的食品安全分析方法大多数存在前处理过程复杂,价格昂贵,需要大型的检测仪器,无法实现对样品的实时快速检测。核酸适配体电化学传感器具有亲和力好,选择性高,灵敏度高等优点,因此在食品安全检测中有着较好的发展潜力和广泛的应用前景。本论文的研究工作针对传统电化学传感器在实际检测中响应速度慢的缺点,分别以三磷酸腺苷二钠盐(ATP)和卡那霉素分子作为目标分析物,通过改变核酸适配体的结构设计以及复合探针结合反应的过程,得到了可以对目标分子快速检测的“夹心型”片段式适配体探针和“一步竞争结合型”适配体探针。以两种新型核酸适体探针为基础构建的新型电化学传感器对目标分子均表现出了较高的灵敏度和响应速度,并且具有良好的选择性和特异性,最终在实际样品的检测中也获得了很好的回收率。论文主要进行的研究内容和结果包括:(1)核酸适配体片段式探针电化学传感器的设计及ATP的检测应用。置换型核酸适配体电化学传感器虽然应用范围广,但是在实际样品检测中,由于核酸适配体链和互补链杂交时间较长,限制了适配体对目标分子的快速识别,从而造成了实际检测响应时间长的缺点,而传统“夹心型”电化学传感器虽然响应速度快,但对目标分子检测的灵敏度有限。因此,论文第二部分以传统“夹心型”核酸适配体探针为基础,巧妙地将一条完整的核酸适配体链分割成两个片段,使得传感器的背景信号显著降低,当目标分子出现时可以快速地与其形成“夹心型”复合结构,从而得到一种灵敏度高、响应速度快的电化学传感器。实验分别探究了核酸适配体链的浓度、方波伏安测量频率、测试液中Mg2+浓度以及结合时间对传感器信号增益的影响。最后得出:在最优的条件下,该传感器用于检测ATP分子的线性方程为SI/%=5.9610×[ATP]/μM-33.1696(R2=0.9967,SI:signal increase信号增益),线性范围为0.5800μM,检测时间为2 min。(2)一步竞争型核酸适配体电化学传感器的设计及卡那霉素的检测应用。现今抗生素的过度使用已经对社会造成了严重的危害,而食品中卡那霉素残留可能导致病菌对抗生素产生耐药性,从而危及人们的生命安全。卡那霉素残留的传统检测方法费时、昂贵而且需要复杂的实验设备。随着卡那霉素的适配体被筛选出来,置换型双链核酸适体探针是目前应用最为广泛的信号转换方式之一。虽然该类传感器已经达到了较高的灵敏度,但还是存在检测时间过长的问题。本实验以卡那霉素为目标分析物设计了一步竞争型传感器,将互补链和目标分子同时加入,从而不需要先让适配体和互补链杂交,极大地减少了检测时间,缩短了实验步骤。为了获得更高的灵敏度,实验还优化了互补链的浓度、方波伏安测量频率、测试液中盐离子的浓度以及pH值,并且详细考察了该传感器对卡那霉素的检测性能。结果显示:在最优的条件下,传感器对卡那霉素分子检测的线性方程为SI/%=0.7723×[Kan]/μM+8.7895(R2=0.9963),线性范围为0.575μM,检测时间为2 min。
其他文献
在信息化建设突飞猛进的时代背景下,中国石化集团作为世界五百强之一的大型企业,自主建设了一批企业级信息系统。由于系统比较复杂庞大,前期系统建设缺乏长期合理的规划,积累了众多问题亟待解决。通过建设IT共享服务系统,促使IT部门与业务部门的有效融合,实现了对不同信息系统的统筹管理,提高了处理质量和效率,实现了IT资源集约化,管理标准化规范化,为企业提质增效升级提供了有力支撑和保障。本文结合中国石化信息系
<正>2015年支农再贷款使用情况2015年友谊县人民银行共为友谊农村商业银行提供支农再贷款资金43000万元,为该行发放涉农贷款提供了有力的支持,坚定了其服务"三农"的信心,有效
农业是人们赖以生存和发展的基础,无论是科技的发展还是经济的进步,都需要农业的支持。当下农业的发展不能再依靠传统的方式来进行,而是要充分跟进现代化发展步伐,加快变革农
我国社会信息水平不断发展,对于层出不穷的新信息传播途径,传统的信息传播与服务媒介面临着巨大的挑战.当前互联网技术的逐步发展,用户信息检索需求猛增,所以传统的公共图书
【正】 书院是我国古代一种独立于官学之外的教育组织形式。它既是教育组织,又是与教育密切结合的学术研究机构,在教育史上占居重要的地位,起过重大的作用。书院发轫于唐,至
MEKK2/3 是由 MAP3K(mitogen-activated protein kinase kinase kinase)家族的Map3k2/3基因所编码的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。MEKK2的激酶活性结构域氨基酸序列和MEKK3的激酶
认罪认罚从宽制度作为优化司法资源配置、调整刑事诉讼职能的新制度,对提升刑事诉讼效率、完善刑事诉讼程序、健全刑事诉讼架构、推进刑事诉讼制度改革具有重要意义。厦门作
<正>不久前,人民日报跟踪报道"浏览器主页劫持"等技术霸凌问题,引起有关各方高度重视。国家市场监管总局相关负责人表示,强制或变相强制消费者浏览特定网页等行为违反相关法
目的分析克拉霉素(江西汇仁药业有限公司,国药准字H20033513)、阿奇霉素(亚宝药业集团股份有限公司,国药准字H20051466,规格500 mg/5 ml)药物不良反应特点,总结防治对策。方
消除贫困是当今世界面临的全球性挑战,是人类的共同使命,更是党执政宗旨的归依和政府义不容辞的责任。十八大以来,国家将扶贫工作上升到国家战略布局的层面,正式把精准扶贫、