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腺样囊性癌(ACC)是一种临床常见的口腔颌面部恶性肿瘤,发病率占所有唾液腺肿瘤的10%左右,占所有唾液腺恶性肿瘤22%,占所有的头部和颈部恶性肿瘤约1%。小唾液腺及口腔是最常见的发病位点。ACC具有嗜神经侵袭(PNI)的特性,该特性是临床诊断和治疗ACC的一个难点。上皮间质转化(EMT)是指细胞由上皮形态转化为间质形态,是一个快速且通常可逆的细胞表型的改变,目前已被广泛引入肿瘤的发生发展研究中来。p53基因是一个公认的抑癌基因,国际癌症研究机构(IARC)p53数据库中含有超过26,000个体细胞突变型p53基因。不同肿瘤中p53基因突变的发生率不同,造血系统恶性肿瘤p53突变率约为10%,而卵巢癌、大肠癌、头颈部恶性肿瘤的突变率为50-70%。在本课题组前期的研究中发现,涎腺腺样囊性癌嗜神经侵袭基因表达谱中p53基因存在表达下调的情况,另有文献报道53基因可以调控乳腺癌细胞的EMT过程。因而揭示p53、EMT、涎腺腺样囊性癌PNI之间的相互关系在ACC的PNI研究和临床治疗中就产生了重要意义。目的:1.通过RNA干扰实验探明P53基因是否可以调控ACC发生EMT。2.通过实验探索p53基因与涎腺腺样囊性癌PNI之间的关系。方法:1.通过Real time-PCR、Western blot技术筛选出p53基因RNA干扰的最佳干扰片段。2.通过RNA干扰技术降低涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83细胞中p53基因的表达,并利用Western blot和流式细胞术检测EMT典型细胞表面标志物的表达情况,从而明确p53基因是否可以调控涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83细胞发生EMT。3.使用MTT细胞活性检测方法探明p53基因表达降低对SACC-83细胞活力的影响4.使用流式细胞术和Annexin V-FITC&PI凋亡检测试剂盒探明p53基因表达降低对SACC-83细胞抗凋亡能力的影响。5.通过Transwell小室细胞迁移实验和划痕实验探明p53基因表达降低对SACC-83细胞体外嗜神经迁移能力的影响。6.通过改良Transwell小室细胞侵袭实验探明p53基因表达降低对SACC-83细胞体外嗜神经侵袭能力的影响。结果:1.成功筛选出p53基因RNA干扰最佳片段p53-homo270。2.RNA干扰降低p53基因表达可以诱导SACC-83发生EMT样转化。3.EMT样转化后的SACC-83细胞具有更强的细胞活力和抗凋亡性。4.EMT样转化后的SACC-83细胞具有更强的体外嗜神经迁移和侵袭能力。结论:1.p53基因可能通过表达降低诱导涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83发生上皮间质样转化;2.p53基因表达降低诱导产生的EMT样SACC-83细胞表型具有高表达间质细胞表型标志物Vimentin、N-Cadherin和C-Cadherin,低表达上皮细胞标志物E-cadherin、EMA和CK5同时这保持上皮细胞极性形态特征的特点;3.p53基因可以通过诱导EMT参与涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83细胞的体外嗜神经侵袭过程;4.p53基因可以通过诱导EMT增强涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83细胞的体外嗜神经侵袭能力;5.EMT样SACC-83细胞具备很强的体外嗜神经侵袭能力。