目的 通过观察中药对肝郁脾虚证胃溃疡差异性基因表达水平的影响,探讨中药干预肝郁脾虚证胃溃疡的作用机制,为指导临床用药提供更有利的实验依据。方法①采用原代细胞系永生化技术,运用慢病毒载体构建肝郁脾虚证胃溃疡模型中差异基因载体,转染至正常胎鼠的胃黏膜细胞中。②通过细胞活性实验MTS比色法和激光共聚焦显微镜,观察验证M、I、G、F基因的差异性表达。③观察验方柴黄胃溃宁对目的基因表达的调节作用,从而证实柴黄胃溃宁的确切疗效及其作用机制。结果①通过慢病毒的方法成功构建大鼠胃粘膜永生化细胞系,并且成功转染。②MTS比色法细胞活性实验示在一定浓度下(0.5μg/μl-1μg/μl),在一定时间内(加药24h),转染结果最佳,转染M、F、G目的基因,细胞生长加快;转染I目的基因,细胞生长减慢。用中药干预后,M、F、G细胞生长速度更快(P<0.05或P<0.01),其中M基因以黄芪组疗效最佳,F、G基因以柴黄高剂量组为最佳;I细胞生长速度更慢(P<0.05),I基因以柴黄高剂量组为佳。③激光共聚焦观察结果示M、F、G组转染目的基因后,转染亮度增加,用中药干预后,双染色亮度、面积均逐渐增加,F、G以柴黄胃溃宁中剂量组明显,M以黄芪组明显;I基因转染后,目的基因明显呈低表达,中药干预后,目的基因低表达更明显,以柴黄胃溃宁中剂量组的药效更明显。③激光共聚焦观察结果示M、F、G组转染目的基因后,转染亮度增加,用中药干预后,双染色亮度、面积均逐渐增加,F、G以柴黄胃溃宁中剂量组明显,M以黄芪组明显;I基因转染后,目的基因明显呈低表达,中药干预后,目的基因低表达更明显,以柴黄胃溃宁中剂量组的药效更明显。结论①用慢病毒法可以成功构建肝郁脾虚证胃溃疡目的基因载体。②肝郁脾虚证胃溃疡与胃黏膜中M、I、F、G基因的差异性表达密切相关。③验方柴黄胃溃宁上调或下调基因的差异性表达,可能是其治疗肝郁脾虚证胃溃疡的内在机制之一。