低分子柑橘果胶的物理制备法研究及其抗癌活性的初步评价

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柑橘果胶(Citrus pectin, CP)是一类膳食纤维。由于天然CP分子质量较大,人体胃肠道内缺少将其降解的酶,故不能被人体很好地吸收利用。据报道,CP具有抗癌的生物活性,但因其分子质量较大,难以较好地发挥抗癌功效。通过化学方法即pH修饰法可降低其分子质量,得到低分子柑橘果胶(Low Molecular Citrus Pectin, LMCP),从而使其容易被肠道吸收并进入血液循环发挥抗癌等功效。目前pH修饰法制备LMCP的技术已趋向成熟,但此法耗时长,操作繁琐,而物理方法操作简单、节省资源和时间。目前对于物理方法的研究较少,不够深入系统。本论文研究了LMCP的物理制备方法并对其抗癌活性进行初步评价,研究结果如下:(1)以温州蜜柑皮为原料提取果胶,采用高压蒸汽法和高压均质法分别处理提取的CP溶液。从分子质量、果胶得率和感官评价综合考虑,得出制备LMCP的物理方法为高压蒸汽法,条件为120℃.101.2MPa、30min,所得果胶为黄色粉末状固体,得率为3.1%,分子质量为16kDa。(2)对温州蜜柑皮LMCP的理化性质进行测定。结果表明:温州蜜柑皮LMCP为单一多糖物质,不含蛋白质和核酸。LMCP的半乳糖醛酸含量由CP的74%升高为88%,酯化度由CP的70%下降为62%,水分含量为6.15%,酸不溶灰分含量为0.48%,重金属铅、砷、汞、镉的含量均达到食品安全国家标准的规定,单糖成分中含有鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖和半乳糖。产品具有较强的清除羟基自由基的能力。(3)分别以温州蜜柑皮、温州蜜柑果渣、胡柚皮和胡柚果渣为原料,采用高压蒸汽法制备LMCP。结果表明:温州蜜柑皮和胡柚果渣分子质量下降最为明显,Mw分别下降了92%和89%,分子质量在10kDa左右;温州蜜柑果渣和胡柚皮中Mw分别下降了70%和65%,分子质量在50kDa以上。四种果胶经高压蒸汽处理后半乳糖醛酸含量均有不同程度的升高,酯化度有不同程度的下降。(4)对LMCP的抗癌活性进行初步评价。结果表明:LMCP对前列腺癌PC3细胞有很强的抑制作用,高剂量(5-10mg/mL)下抑制率达70%-90%,半数抑制浓度(IC50)与CP相比明显下降,其中以温州蜜柑皮和胡柚果渣LMCP抗癌活性较高且稳定性较好。相对于天然CP, LMCP抗前列腺癌细胞活性显著提高。通过本研究,得出以温州蜜柑皮和胡柚果渣为原料采用高压蒸汽法制备得到的LMCP分子质量较低,抗癌活性较好,是提取制备LMCP的较佳原材料。
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