植物14-3-3基因家族的进化和功能分析

来源 :中国科学院植物研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:flurryzhang
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14-3-3蛋白家族结构非常保守,被认为广泛存在于所有真核生物的各组织器官中。已有研究表明,14-3-3蛋白可以和上百种蛋白进行相互作用,作为许多细胞进程的重要调节因子参与植物生长发育、细胞周期调节、细胞凋亡和信号转导等多个调控网络。植物14-3-3蛋白家族包括两大类:Epsilon group和Non-epsilon group。我们对这两类蛋白序列进行了进一步的分析,发现这两类蛋白有明显的更小亚类分布,并且不同的亚类包含有不同的模体。从对水稻和拟南芥中的14-3-3基因的分析结果来看,这两类基因在染色体上的分布以及外显子数目明显不同,我们认为这两类蛋白有着不同的进化历史。达尔文正选择在蛋白进化过程中起着很重要的作用,我们对两类蛋白受到的正选择进行分析,分别发现了一些受到正选择的位点,这些位点可能在两类蛋白的进化过程中起着关键作用。水稻是最主要的粮食作物之一,水稻14-3-3基因包含8个成员:GF14a、GF14b、GF14c、GF14d、GF14e、GF14f、GF14g、GF14h。我们选取其中的OsGF14c作为研究对象,对水稻14-3-3的功能做一定探讨。OsGF14c基因位于水稻8号染色体上,cDNA全长1154bp,编码256个氨基酸。序列分析表明该基因与酵母同源基因BMH2有71%的同源性,我们通过将OsGF14c转入BMH2缺陷型酵母中,发现可以互补酵母14-3-3缺陷的表型。同时对OsGF14c所做的酵母双杂交实验表明,蛋白本身在体外可以形成同源二聚体。基因稳定表达结果显示,OsGF14c定位在细胞膜上以及细胞质中。为了更好的研究该基因的功能,我们通过构建的过表达载体异源转化拟南芥,得到纯合体后我们进行了一系列的胁迫和激素处理。激素、PEG8000、LiCl和甘露醇处理的植株均未表现出明显的表型,而NaCl、KCl处理后的植株表现出盐敏感的表型。
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