胃癌在演进异质化过程中缺氧状态及意义的研究

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目的 检测胃癌细胞线粒体呼吸链蛋白——琥珀酸脱氢酶(SDHD)基因的杂合性丢失(loss of heterozygosity,LOH)及细胞色素C(cytochrome C)和缺氧诱导因子-1α(hyooxia induced factor-1α,HIF-1α)在胃癌及癌旁组织中的表达,以了解胃癌在其演进与异质化过程中缺氧状态的变化,探讨其意义及其与肿瘤演进与异质化关系。 方法 1)选取了与琥珀酸脱氢酶(SDHD)紧密连锁的三个微卫星,应用PCR-LOH分析(SSLP)的方法对35例新鲜胃癌标本(包括中、低分化腺癌和粘液腺癌)及其相应的癌旁组织进行了SDHD基因杂合性丢失(LOH)的研究;2)应用免疫组织化学的方法对50例石蜡包埋的人胃癌及癌旁组织进行了细胞色素C及HIE-1表达的检测;所得结果采用了t检验、卡方检验及四格表精确概率法进行了统计学分析。 结果 琥珀酸脱氢酶(SDHD)基因在胃癌组织中存在着非随机性杂合性丢失(LOH),三个位点的综合检出率为19.35%(6/31)。细胞色素C在癌旁组织中表达的平均光密度值为0.41048,而在胃癌组织中表达得平均光密度值为0.20677,二者的差别有显著的统计学意义(p<0.01);另外它在各个分组肿瘤中表达的差异性均有统计学意义(p<0.01)。HIF-1α在癌旁组中的表达为阴性,而在肿瘤中的总表达率为44.00%(22/50),其主要表达于肿瘤细胞的胞核及胞浆内;它在不同分化程度及有无淋巴结转移组的肿瘤中的阳性表达率存在着明显的差别,并具有统计学意义(p<0.05)。二者在不同肿瘤组织及同一肿瘤不同细胞中的表达均存在着明显的异质性。另外,在LOH阳性组的胃癌组织中,细胞色素C的及HIE-1α的表达均高于LOH阴性组,并且差别有统计学意义(p<0.05)。 结论 1)胃癌瘤细胞内存在着SDHD基因的LOH,可以认为它是由核基因编码的一种特殊类型的肿瘤抑制因子;其基因改变会使线粒体有氧呼吸功能不同程度的丧失,而参与发生所谓的“主动缺氧”,并随肿瘤的演进与异质化呈进行性加重;2)线粒体呼吸链重要成员细胞色素C表达与肿瘤分化程度呈正相关,即随肿瘤恶性程度增高、侵袭能力增强,其细胞呼吸功能抑制加重,肿瘤细胞分化越低其线粒体发育越不完善;其在同一肿瘤中其表达的明显差异与肿瘤演进与异质化相关。3)HIF-1α在胃癌的阳性表达是肿瘤“主动缺氧”的作用结果,其在不同分化胃癌和同一肿瘤不同细胞中的表达差异是胃癌不断演进与异质化的结果。4)一方面肿瘤本身由于分化不好可以导致线粒体的发育异常并发生“主动缺氧”,另一方面线粒体功能的
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