牛奶中的微生物污染是影响食品安全的重要因素。即使在经过严格杀菌处理的巴氏牛奶中,仍会残留一些条件致病菌,比如金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌等。这会给人类身体健康带来潜在风险,严重时会引发食物中毒甚至休克。然而国内对从巴氏牛奶中筛选出的不同种类的葡萄球菌的毒力耐药性、生物被膜及抗逆性方面的研究很少。故本实验从合肥某超市120份不同批次的巴氏牛奶样品里,经过细菌分离纯化、基因组DNA提取、16S r RNA测序鉴定,共分离鉴定出了6株金黄色葡萄球菌、5株表皮葡萄球菌、5株沃氏葡萄球菌、4株腐生葡萄球菌和4株巴氏葡萄球菌。对上述研究较少的方面进行实验设计、验证,为了解其特性及预防潜在感染提供依据。为研究巴氏乳源葡萄球菌的毒力性和耐药性。通过普通PCR检测6种常见毒力基因（免疫球蛋白结合蛋白基因lg、肠毒素基因sea、溶血素基因hla、凝固酶基因coa、凝集因子基因clf A和纤连蛋白结合蛋白基因fnb A）和6种常见耐药基因（甲氧西林耐药基因mec A、庆大霉素耐药基因aac A-aph D、林可霉素耐药基因lin A、青霉素耐药基因bla Z、四环素耐药基因tet K和红霉素耐药基因erm B）在不同细菌内的流行情况。毒力基因检测结果显示6株金葡菌均含有4个及以上基因,组合形式最为复杂;5株表皮葡菌均含有lg和sea 2个毒力基因;lg和hla在5株沃氏葡菌中的检出率达到80%;lg和hla在4株腐生葡菌中的检出率达到75%。耐药基因检测结果显示6株金葡菌均含有全部检测的耐药基因;5株表皮葡菌和5株沃氏葡菌均含有5个及以上耐药基因;4株腐生葡菌均含有2个及以上耐药基因;4株巴氏葡菌均含有3个耐药基因。MIC（最小抑菌浓度）实验结果从侧面与耐药基因检测结果保持一致,显示巴氏乳源葡萄球菌均具有多重耐药性。生物被膜的形成能够帮助细菌适应逆境压力。通过96孔板生物被膜实验,结果显示巴氏乳源葡萄球菌均能形成生物被膜,且结合酶标仪OD492值表明24株葡萄球菌成膜能力均在中等以上。有研究表明,乳糖能够促进PIA的合成,为了探究乳糖对巴氏乳源葡萄球菌的成膜影响,通过往培养基里加入1%浓度的牛奶,结果显示除2株葡萄球菌外,其余菌株的成膜效果较之前更好。PIA合成基因依赖型和非PIA合成基因依赖型是葡萄球菌成膜的两种基因类型。为了判断巴氏乳源葡萄球菌的成膜类型,选取4个PIA依赖型主要相关基因（atl、ica A、ica D和ica BC）和2个非PIA依赖型主要相关基因（bap、aap）进行PCR检测。结果显示22株葡萄球菌的成膜基因型是PIA合成基因依赖型。为了研究巴氏乳源葡萄球菌的抗逆性,模拟巴氏灭菌法进行了高温（63℃20 min和75℃30 s）、干燥实验（5天）。结果显示5种葡萄球菌在生物被膜态下的存活率均高于浮游态下的存活率。金葡菌作为重要的致病菌,将巴氏乳源金葡菌和实验室保存的人源金葡菌NCTC8325和生牛乳源金葡菌（RMSA1、RMSA2和RMSA3）进行抗逆实验,结果显示6株巴氏乳源金葡菌在生物被膜态下的存活率均高于人源及生牛乳源金葡菌在生物被膜下的存活率。