小鼠胚胎培养方法的研究

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liyan2006
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目的:探讨小鼠早期胚胎在不同的体外培养液中生长发育的状况,从而寻找胚胎培养的最佳培养体系,为人类胚胎培养方法的改善提供理论依据,以提高临床体外受精—胚胎移植(IVF-ET)的成功率。 方法:配制不同的培养液,对100例小鼠超排卵共取卵子1678枚,分别在不同的培养液中进行体外授精,并将2-细胞鼠胚放入各组培养液中进行培养,其中,血清组的培养液为Earle培养液加10%人血清;卵泡液组的培养液为Earle培养液加10%人卵泡液;蜕膜细胞条件培养液组的培养液为Earle培养液加10%条件培养液;血清加卵泡液组的培养液为Earle培养液加10%人血清和5%人卵泡液;血清加条件培养液组为Earle培养液加10%人血清和5%条件培养液。每日在显微镜下观察小鼠胚胎的发育情况,分析受精率、卵山冠厅医科大学硕d二学位论文裂率、卵裂速度及桑堪胚与囊胚形成率,采用X“分割检验进行统计分析。 结果: 一、1、小鼠胚胎在蜕膜细胞条件培养液中有72.9%发育到8一细胞期,“.0%发育到桑堪胚,61.6%形成囊胚,32.1%胚胎孵化。而对照组有43.6%发育到8一细胞期,30.9%发育到桑堪胚,19.1%到初级囊胚,5.5%孵化的胚胎。两组比较有显著性差异。2、卵泡液的胚胎有71.3%到8一细胞期,58.8%发育到桑堪胚,50.0%形成囊胚,25.7%孵化。与对照组比较有差显著性异。3、血清组有53.4%发育到8一细胞期,40.5%到桑堪胚,29.3%形成囊胚,仅有7.8%孵化。与对照组无显著性差异。 二、鼠卵在不同培养液中受精率无显著性差别,而对于卵裂率和优质胚胎的形成率,鼠卵在蜕膜细胞条件培养液组和卵泡液组中均与对照组有显著性差异,而血清组与对照组比较无差异。鼠胚在蜕膜细胞条件培养液和卵泡液中培养发育速度快,碎片率明显低于对照者。 三、小鼠早期胚胎在卵泡液组、蜕膜细胞条件培养液组 山冠穿医科大学石页士学位论文中的调亡速度明显低于对照组,有显著性差异,而血清组中鼠胚的调亡速度低于对照组,但无显著性差异。 四、小鼠胚)}台在血清加卵泡液组中发育到8一细胞j梦J,桑堪胚,囊胚及孵化胚胎的比率分别是72.7%,62.3%,51 .2%和28.5%,在血清加条件培养液组中则分别有74.1%,68.5%,62.0%和35.2%发育至8一细胞期,桑堪胚,囊胚和孵化胚胎。各组与血清组比较均有显著性差异(P<0.01)。 结论:早孕蜕膜细胞能释放某些刺激胚胎发育的物质,司’以促进胚胎体外发育,并提高胚胎发育质量。卵泡液对早期胚胎发育有促进作用,早期胚胎培养中,在培养液中添加人卵泡液对提高早期胚胎培养质量有显著的效果。
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