【摘 要】
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目的:研究顺铂(cisplatin,DDP)能否激活人膀胱癌T24细胞自噬以及其中可能的机制,并且探索自噬和凋亡之间相关性。方法:采用Western blot技术检测细胞内LC3-II、P62蛋白和细胞
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目的:研究顺铂(cisplatin,DDP)能否激活人膀胱癌T24细胞自噬以及其中可能的机制,并且探索自噬和凋亡之间相关性。方法:采用Western blot技术检测细胞内LC3-II、P62蛋白和细胞外信号调节蛋白激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase,ERK1/2)和磷酸化ERK1/2蛋白的表达量。检测自噬抑制剂渥曼青霉素(wortmannin,WTM)抑制自噬后对膀胱癌T24凋亡的影响。结果:顺铂可显著抑制T24细胞的增殖(P<0.05),并呈浓度依赖性,半数抑制浓度(IC50)为(30.3±2.4)μg/mL。DDP诱导膀胱癌T24细胞自噬活化,使LC3-II蛋白的表达明显升高(P<0.05),P62蛋白的表达明显下降(P<0.05);细胞自噬体数目明显增加。DDP能上调ERK1/2的磷酸化(P<0.05);ERK1/2通路抑制剂U0126抑制DDP诱导的膀胱癌T24细胞自噬活化,使LC3-II蛋白的表达明显下降(P<0.05)。自噬抑制剂渥曼青霉素(wortmannin,WTM)抑制自噬后明显加强DDP对T24细胞的增殖抑制和凋亡促进作用(P<0.05);在DDP和WTM联合处理组,凋亡指标多聚ADP-核糖聚合酶1(PARP 1)裂解明显增强,cleaved-Caspase3明显增多(P<0.05)。结论:抑制自噬活化可以增强膀胱癌T24细胞凋亡,证明顺铂诱导的自噬对膀胱癌T24细胞是保护性的,并且进一步发现了自噬活化的机制可能与ERK信号通路的激活有关。
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