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目的:探讨丹参对内毒素(LPS)致急性肺损伤(ALI)大鼠转化生长因子β<,1>(TGF-β<,1>)表达的影响。
方法:用LPS(E.Coli O<,55>:B<,5>)复制AL工大鼠模型。健康SD大鼠24只采用简单随机的方法分为3组,每组8只,雌雄不拘。1)ALI组:LPS(5mg/kg)经尾静脉推注;2)对照组:LPS用生理盐水代替; 3)丹参治疗组:LPS(5mg/kg)经尾静脉推注,1h后经尾静脉推注丹参(10g/kg)。各组动物模型制备后均于LPS或生理盐水注射后观察12h,观察有否呼吸困难及呼吸频率变化。取静脉血2ml抗凝后,用血液粘度测试仪进行血流变分析。放血处死动物,然后开胸取整个左肺,用滤纸吸干血渍,分析天平称重后放入80℃恒温烤箱烘烤24小时,计算肺湿/干重(W/D)比值来评价肺组织的水肿程度。右肺上叶组织制备病理切片,进行HE染色和免疫组化染色,光镜下观察组织病理学变化及TGF-β<,1>的染色结果,并用H score方法对TGF-β<,1>的表达进行半定量评价。
结果:1、肺组织病理切片光镜观察:ALI组肺组织毛细血管充血,肺间质肿胀,肺泡间隔水肿增厚,内有大量炎性细胞浸润,肺泡腔内可见水肿液,部分肺泡萎缩不张;对照组肺泡结构完整,肺泡壁光滑,肺泡间隔薄,且均匀一致,肺泡腔中无渗出液;丹参治疗组与ALI组比较,肺泡间隔水肿和炎性细胞浸润明显减轻。2、对照组TGF-β<,1>在肺泡上皮细胞(21±10.25)和肺微血管内皮细胞(5.25±2.25)表达水平H score较低;与对照组相比,ALI组TGF-β<,1>在肺泡上皮细胞(115.3±18)和肺微血管内皮细胞(22.5±11.7)表达H score明显增高(P<0.01),其W/D比值增加(3.73±0.23)(P(0.01),血液流变学检测指标LS(14.9±3.5 mPa·S)MA(9.7±1.9 mPa·S)HS(4.9±0.9mPa·s)均增高(P(0.05),HT(45.0±2.6%)增高(P(0.01);与ALI组比较,丹参治疗组TGF-β,在肺泡上皮细胞(56.5±10.7)和肺微血管内皮细胞(14.5±5.7)表达Hscore明显降低(P<O.01),W/D比值降低(2.72±0.17)(P<O.05),血液流变学检测指标Ls(10.2±1.3mPa·s)Ms(6.6±1.3 mPa·s)Hs(3.7±o.7mPa·s)均降低(P<O.05),HT(40.4±4.46%)降低(P<0.01)。
结论:内毒素引起的急性肺损伤中,肺水肿明显,存在高凝状态,肺上皮和肺血管内皮细胞TGF-β<,1>表达增加。实验表明TGF-β<,1>的表达增加在ALI肺水肿形成过程中发挥了重要作用,丹参通过抑制TGF-β<,1>的表达和改善高凝状态而对肺有保护作用。