BMSCs静脉移植治疗dMCAO大鼠的疗效及早期作用机制

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目的:探讨同种异体骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)静脉移植治疗大脑中动脉远端阻塞(Distal middle cerebral artery occlusion, dMCAO)大鼠脑缺血模型的疗效及早期作用机制。方法:90只SPF级SD雄性大鼠随机分为假手术组、缺血对照组和BMSCs静脉移植组,每组30只。采用dMCAO制备大鼠脑梗死模型,造模后1h经尾静脉移植同种异体大鼠BMSCs.移植后48h进行TTC染色测定大鼠脑梗死体积,用ELISA检测梗死灶周边皮层区IGF-1,bFGF水平,采用免疫组织化学法染色并计数梗死灶周边皮层区CD68、Iba-1染色阳性的小胶质细胞数;并分别于第1d、3d、5d和7d通过圆柱容器试验、爬格试验和平衡木试验对缺血对照组和BMSCs静脉移植大鼠组进行行为学评价。用ELISA检测2d、4d和7d外周血及梗死灶核心区炎症因子(IL-4、IL-6、IL-10、IL-1β和TNF-a)含量。结果:大鼠脑梗死48h后,BMSCs静脉移植组的梗死体积较对照组显著减小(P<0.05)。在脑梗死初期,圆柱容器试验(第1d、3d、5d),爬格试验(第1d、3d)结果显示BMSCs静脉移植组的行为学较对照组改善明显(P<0.05),第7d两组未检测出明显差异,平衡木试验在各时间点未能检测出行为学差异;梗死灶周边区营养因子IGF-1, bFGF较对照组显著增高(P<0.05);梗死灶周边皮层区CD68、Iba-1染色阳性的小胶质细胞数与对照组比较无统计学差异(P>0.05);外周血中的炎症因子含量检测结果示:(1)在BMSCs移植后第2d,移植组的IL-6含量较对照组显著升高(P<0.05),IL-4和IL-1β有下降趋势,TNF-a有升高趋势,但无统计学差异,IL-10较对照组无明显变化。(2)在BMSCs移植后第4d,移植组的IL-6含量较对照组明显升高(P<0.05), TNF-α和IL-1p含量亦有升高趋势,但无统计学差异,IL-4和IL-10含量较对照组无明显变化。(3)在BMSCs移植后第7d移植组的IL-1p和TNF-α含量较对照组显著降低(P<0.05),IL-10含量有升高趋势,但无统计学差异,IL-4和IL-6含量较对照组无明显变化。脑组织中炎症因子含量检测结果示:(1)在BMSCs移植后第2d,移植组的IL-6含量较对照组有降低趋势,但无统计学差异,移植组的IL-4、IL-10、TNF-a和IL-1p含量较对照组无明显变化。(2)在BMSCs移植后第4d,移植组的IL-10、TNF-α和IL-1β含量都有升高趋势,但无统计学差异,IL-4和IL-6含量较对照组无明显变化。(3)在BMSCs移植后第7d,移植组的IL-4、IL-6及TNF-a含量虽无统计学差异,但均有下降趋势,IL-10和IL-1β含量较对照组无明显变化。结论:BMSCs静脉移植可减小dMCAO大鼠脑梗死体积,改善其行为学缺损;BMSCs移植的早期疗效可能与IGF-1、bFGF的营养作用相关;在移植后第7d外周血中TNF-a和IL-1p含量明显下降,可能与BMSCs的抗炎作用相关。
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