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第一部分SLE患者与正常人CpG基序甲基化状态与DNMT的表达目的研究系统性红斑狼疮患者(SLE)CpG基序甲基化状态和DNA甲基转移酶(DNMT)的mRNA表达水平，并探讨两者的关系。方法分离38例SLE患者与19例正常人外周血淋巴细胞，分别用5-甲基胞嘧啶抗体与流式细胞仪检测CpG基序甲基化水平和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析DNMT1、DNMT3A、DNMT3B的mRNA表达水平。结果活动期SLE患者的CpG基序甲基化水平(8．08±1．70)低于正常对照组(11．61±1．20，P＜0．01)与缓解期SLE患者(10．97±1．46，P＜0．05)，正常人与缓解期SLE患者的CpG基序甲基化水平相比，差异无统计学意义(P＞0．05)。SLE患者的CpG基序甲基化水平与SLE-DAI成负相关(r=-0．79，P＜0．05)。活动期SLE患者(0．4214±0．178)与缓解期SLE患者(0．5164±0．162)的DNMT1表达水平均低于正常对照组(0．7814±0．192，P＜0．05)。活动期、缓解期SLE患者DNMT1的表达水平相比，无明显统计学意义(P＞0．05)。活动期(0．6984±0．183)、缓解期(0．760±0．175)SLE患者及正常人(0．724±0．158)的DNMT3A表达水平相比，差异无统计学意义(P＞0．05)。DNMT3B的表达水平极低。活动期与缓解期SLE患者DNMT1的表达水平与SLE-DAI的相关性不明显(r=-0．23，P＞0．05)。SLE患者CpG基序甲基化水平与DNMT1的表达水平相关性不明显(r=0．28，P＞0．05)。结论SLE患者CpG基序甲基化水平的下降在SLE发病机制中具有重要作用。DNMT1表达水平的下降在SLE发病机制中可能起重要作用，但不是决定SLE患者CpG基序甲基化状态的惟一因素。第二部分内外因素对CpG基序甲基化状态与DNMT1表达的影响目的探讨5-氮杂胞苷、雌二醇及紫外线(254nm)对SLE患者与正常人CpG基序甲基化状态与DNMT1表达的影响。方法分离12例SLE患者与11例正常人外周血淋巴细胞，经PHA刺激1天后，分为未处理组、5-氮杂胞苷组、雌二醇组、紫外线组，继续培养3天后分别用5-甲基胞嘧啶抗体与流式细胞仪检测CpG基序甲基化水平和实时定量逆转录-聚合酶链反应(real time RT-PCR)分析DNMT1的mRNA表达水平。结果与非处理组相比，5-氮杂胞苷组SLE患者与正常人的CpG基序甲基化水平均下降(p＜0．1)，DNMT1表达水平的下降无统计学意义(p＞0．05)；雌二醇组、紫外线组SLE患者与正常人的CpG基序甲基化水平与DNMT1的mRNA表达水平的差异均无统计学意义(p＞0．05)。结论5-氮杂胞苷可抑制CpG基序甲基化状态，其抑制作用的产生与DNMT1表达水平的下降无明显相关性。雌二醇与紫外线(254nm)对CpG基序甲基化状态与DNMT1的表达水平的影响无统计学意义。第三部分甲基CpG结合域蛋白的构建、表达、鉴定目的在大肠杆菌中表达甲基CpG结合域四聚体蛋白，并对其进行纯化和鉴定。方法将重组表达质粒4×MBD-pETI30b+转化大肠杆菌DH5a克隆扩增并测序鉴定后，转化大肠杆菌BL21(DE3)后接种于LB培养基中，异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白的表达，表达产物经Ni-NTA亲和纯化，通过SDS-PAGE和Westem blotting鉴定蛋白表达。结果克隆质粒测序结果与理论预期完全一致，SDS-PAGE显示在大肠杆菌中表达出分子量为46000的目标蛋白，Westernblotting显示目标蛋白带有His融合标签(氨基端)和HA标签(羧基端)。结论成功表达、纯化了甲基CpG结合域四聚体蛋白，为今后进一步研究DNA甲基化及其调控因素奠定了基础。