粤蓝链霉菌中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因gra-orf7功能初探

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链霉菌中存在丰富的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Serine/Threonine protein kinase,STPK),在ATP等磷酸供体的存在下,能够特异地使底物蛋白中丝氨酸/苏氨酸残基上的羟基磷酸化而激活底物蛋白,导致蛋白活性、性质的改变,从而参与其生长、发育分化及次级代谢等多种重要的生命活动过程。对其功能研究将为我们深入了解链霉菌的生命活动规律提供帮助。粤蓝链霉菌(Streptomyces vietnamensis)GIMV4.0001广东省微生物研究所,广东省菌种保藏与应用重点实验室近期从热带原始森林土壤中分离获得的一株能够产榴菌素的链霉菌新种。前期研究发现在其榴菌素生物合成基因簇的左翼存在一个可能的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因gra-orf7。为了解该基因在粤蓝链霉菌中的生理功能,本研究采用PCR-targeting系统成功地构建了粤蓝链霉菌gra-orf7基因缺失突变株。对粤蓝链霉菌gra-orf7基因缺失突变株的表型分析结果显示,突变株在菌落形态、产孢能力、孢子形态以及色素(榴菌素)最终产率等方面与野生株均无显著差异,但是产色(榴菌素)时间延迟约1h。表明gra-orf7基因在粤蓝链霉菌的发育分化和榴菌素的生物合成过程中并不扮演重要角色,但是突变株的产色延迟现象与gra-orf7基因的失活直接相关。从而揭示gra-orf7基因在粤蓝链霉菌中具有一定的生物学功能,可能参与了与榴菌素生物合成有关的上游调控信号的传导,也可能是gra-orf7基因的目标蛋白被其它未知STPK激活,形成某种补偿机制。
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