DNA甲基转移酶在儿童免疫性血小板减少症中的蛋白表达

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背景在儿童时期,最常见的出血性疾病为免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia,ITP)。其发病机制尚未完全阐明,现公认主要与细胞免疫、体液免疫有关。近年来,表观遗传学在自身免疫性疾病、肿瘤等方面进行了大量研究,尤其在DNA甲基化、DNA甲基转移酶(DNAmethyltransferase,DNMT)方面。有研究表明DNA甲基转移酶的异常表达与自身免疫性疾病等密切相关,但关于DNA甲基转移酶与儿童ITP发病机制的关系的研究报道的不多。目的通过检测新诊断ITP患儿外周血清中DNA甲基转移酶的蛋白表达水平,进一步探讨DNMTs在儿童ITP发病机制中的作用。方法1、研究对象入选标准依据2013年中华医学会儿科学分会血液学组制定的ITP诊断及分型标准,选择新乡医学院第一附属医院2015年5月至2016年5月期间在门诊病房就诊和治疗的ITP患儿,选取新诊断患儿60例纳入研究组,36例同期门诊健康体检儿童纳入对照组。两组在4周内均未应用维生素B6、维生素B12及叶酸。研究组年龄、性别与对照组相比,差异无统计学意义。2、测定DNMTs的蛋白水平表达无菌采集受试对象,外周静脉血2ml,收集血清,应用酶联免疫方法检测血清中DNMT1、DNMT3a及DNMT3b的蛋白表达水平。3、统计学处理采用SPSS19.0进行统计数据分析。计量资料以均数±标准差((?)±S)表示;两样本均数比较选取独立样本t检验,DNMTs的蛋白表达水平之间的相关性分析采用Pearson相关分析;计数资料选择卡方检验。P<0.05有统计学差异。结果1、两组DNMTs蛋白表达水平研究组与对照组DNMT1蛋白表达水平分别为(1.43±0.96)ug/L、(2.05±1.24)ug/L,研究组与对照组相比明显降低,差异有统计学意义(t=-2.547,P=0.013);研究组与对照组DNMT3a蛋白表达水平分别为(0.67±0.39)ug/L、(1.04±0.58)ug/L,研究组与对照组相比明显降低,差异有统计学意义(t=-3.692,P=0.000);研究组与对照组DNMT3b蛋白表达水平分别为(0.53±0.39)ug/L、(0.73±0.45)ug/L,研究组与对照组相比明显降低,差异有统计学意义(t=-2.341,P=0.021)。2、不同年龄阶段DNMTs蛋白表达水平研究组DNMT1、DNMT3a及DNMT3b三者的蛋白表达水平在<1岁组、1~5岁组、>5岁组之间均无明显统计学差异(P>0.05)。3、DNMTs蛋白表达与性别的关系DNMT1、DNMT3a及DNMT3b三者的蛋白表达水平在男性组、女性组分别为(1.62±0.93、0.67±0.39、0.55±0.39)ug/L、(1.19±0.97、0.68±0.38、0.49±0.39)ug/L,男性与女性相比,无统计学差异(F=0.118、0.110、0.001,P=0.085、0.877、0.576)。4、DNMTs蛋白表达与PLT的关系研究组DNMT1、DNMT3a、DNMT3b蛋白表达水平与PLT之间均无显著相关性(r=-0.062、0.161、0.079,P=0.636、0.220、0.549)。5、DNMTs蛋白表达之间的关系DNMT1与DNMT3a蛋白表达水平无相关性(r=-0.025;P=0.851);DNMT1与DNMT3b蛋白表达水平无相关性(r=-0.057;P=0.665);DNMT3a与DNMT3b蛋白表达水平呈正相关(r=0.259,P=0.046)。结论ITP患儿存在DNMTs蛋白表达水平的显著降低,提示DNA甲基转移酶的异常表达可能在儿童ITP的发病机制中发挥着一定的作用;DNMTs在儿童ITP的DNA甲基化过程中可能起着协同作用。
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