CHC(Chenghai Chlorin)是脱镁叶绿酸a的主要水解产物,CHC本身与衍生物被广泛的用于癌症的荧光检测和光动力治疗。但是由脱镁叶绿素酸a水解得到的CHC产品成分较为复杂且不易分离。因此,对CHC粗产品的分离纯化具有特别重要意义,常规分离方法分离效率低,制备型高效液相色谱(Prep-HPLC)分离纯化产品效率高且重复性好。本研究课题以天然藻类为原材料,设计了原材料有机溶剂提取、化学连续分级降解、高效液相色谱逐级分析及制备型高效液相色谱制备工艺路线,提取制备得到了较高纯度的CHC,对其以下几个方面进行了详细的研究:(1)利用高效液相色谱技术优化得到了适合CHC的甲酸铵缓冲盐体系的分析条件,使用大连化学物理研究所自制的Z7-C18ME色谱柱,流动相为甲酸铵甲醇,HPLC分析谱图结合质谱测得的分子离子峰信号初步确定主要组分CHC的含量为71%,其余杂质包括紫红素-18等氧化降解产物。(2)根据高效液相色谱条件通过公式得到制备色谱条件。反相条件下使用10mm直径的Z7-C18ME色谱柱进行了半制备,在半制备CHC时,将检测波长由400nm降低至254nm,改变谱图上各个峰的分离度,使得CHC的收集变得容易,且得到的CHC纯度达到98%以上。使用创新通恒LC6000制备系统,开发了一种可以连续制备的分离纯化方法。在50mm直径的制备色谱柱对CHC粗产品进行了分离纯化,提高了CHC产品的纯度,高效液相色谱分析显示纯度达98%以上。