论文部分内容阅读
黄曲霉毒素B1 (Aflatoxin, AFB1)是霉菌的次级代谢产物,具有很强的免疫毒性和致癌性。已有研究表明,免疫细胞的过度凋亡是引起免疫抑制的重要原因。本研究选用1日龄科宝健雏156只,随机分为2组(对照组和AFB1组),每组3个重复,每个重复26只,分别饲以对照日粮(AFB1<0.001 mg/kg)和AFB1日粮(AFB1=0.601 mg/kg),试验周期为21 d。以组织病理学、电镜技术、生物化学法、TUNEL法、流式细胞术及荧光定量PCR等方法探究日粮AFB1诱导雏鸡胸腺和法氏囊细胞凋亡的分子机理。结果如下:胸腺AFB1组雏鸡胸腺脏器指数降低;组织学改变为:皮质区空洞和细胞核碎片增多,胸腺髓质区淤血:电镜观察显示,淋巴细胞染色质边集,线粒体肿胀、脊断裂消失。线粒体膜电位去极化百分比和胸腺细胞凋亡百分比极显著升高(p<0.01)。Bax、Bak-1、Cytc、Apaf-1、caspase-9、caspase-3、FasL、Fas和FADD mRNA表达水平极显著或显著上调(p<0.01或p<0.05),而Bcl-2和Bcl-xL mRNA表达水平显著下降(p<0.01或p<0.05)。SOD、CAT、GSH-Px和GR活力及其mRNA表达水平均显著降低(p<0.01或p<0.05),GSH含量降低,脂质过氧化产物MDA含量显著升高(p<0.01或p<0.05)。结果表明:日粮AFB1可通过活化线粒体和死亡受体途径引起胸腺细胞过度凋亡。法氏囊AFB1组雏鸡法氏囊脏器指数降低;AFB1组雏鸡法氏囊淋巴滤泡内淋巴细胞排列疏松,细胞核碎片增多;电镜观察显示,淋巴细胞染色质边集,线粒体、内质网肿胀。线粒体膜电位去极化百分比、法氏囊细胞凋亡百分比显著升高。凋亡调控基因Bax、Bak-1、Cyt c、Apaf-1、caspase-9、caspase-3、Grp78/Bip、Grp94和CaM的mRNA表达显著上调(p<0.01或p<0.05),Bcl-2和Bcl-xL mRNA表达水平显著降低(p<0.01或p<0.05)。SOD、CAT、GSH-Px和GR活力及其mRNA表达水平均显著降低,GSH含量降低,脂质过氧化产物MDA含量显著升高(p<0.01或p<0.05)。结果表明:日粮AFB1可通过活化线粒体和内质网介导的细胞凋亡调控途径引起雏鸡法氏囊细胞过度凋亡。综上,本试验发现,雏鸡摄食含0.6 mg/kg AFB1的日粮会导致胸腺和法氏囊细胞凋亡的上调,但在凋亡调控通路的活化上存在差异,两个中枢免疫器官均有线粒体途径的活化,但死亡受体途径和内质网途径却分别发生在胸腺细胞和法氏囊细胞中。AFB1所致的氧化应激可能是启动细胞凋亡的重要机制之一。