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5-FU载药控释系统作为—种新的药物剂型能抑制消化道肿瘤细胞的增殖,有关其分子水平的具体作用机制研究甚少。本实验应用5-FU-PLA-O-CMC-NPS检测其对人结肠癌细胞株SW480细胞周期阻滞及相关调控因子P21WAF/CIP、CyclinD1、Rbo表达的影响,探讨5-FU-PLA-O-CMC-NPS抑制人结肠癌细胞株SW480增殖的作用机制。方法1噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度(0.1 ug/ml、1 ug/ml、10 ug/ml、100ug/ml)5-FU-PLA-O-CMC-NPS在不同作用时间(24h、48h、72h、120h)对SW480的增殖抑制率；并通过与5-FU比较,评价5-FU-PLA-O-CMC-NPS的控释特征对抑瘤效应的影响。2流式细胞仪(FCM)检测不同浓度(0.1 ug/ml、1 ug/ml、10 ug/ml、100 ug/ml)5-FU-PLA-O-CMC-NPS在不同时间作用点(0h、24h、72h、120h)对SW480的细胞周期的影响,进一步阐明5-FU-PLA-O-CMC-NPS抑制结肠癌细胞增殖的机制。3采用Westernblot和RT-PCR从蛋白和mRNA水平深入研究SW480 G 1/S细胞周期阻滞及关键调控因子P21WAF/CIP、CyclinD1、Rbo表达的变化，并探讨各因子之间的相互作用。结果1.MTT结果显示：5-FU-PLA-O-CMC-NPS对人结肠癌细胞株SW480的增殖抑制作用呈剂量-时间依赖关系；与5-FU相比,具有良好的控释作用；随着作用时间的延长,5-FU-PLA-O-CMC-NPS在72h对SW480细胞的增殖抑制作用与5-FU接近,无统计学差异(P>0.05)2.FCM结果显示：不同浓度的5-FU-PLA-O-CMC-NPS (0.1ug/ml、1ug/ml、10 ug/ml、100 ug/ml)作用于SW480细胞72h主要发生G1/S期阻滞：G1期比例显著增加由58.74%±1.22上升到81.33%±2.94具有统计学差异(t=-24.027,P=0.032)；S期比例由37.37%±3.42下降到14.82%±3.41,具有统计学差异(t=6.098,P=0.015)。10μg/ml5-FU-PLA-O-CMC-NPS分别作用于SW480细胞24h、72h、120h与未加药对照组相比,G1期比例增高：由70.66%±0.90上升至78.32%±0.14(t=-6.504,P=0.022)S期比例下降：由28.43%±2.75下降至18.66%±1.42(t=4.296,P=0.016),G2/M期无显著性变化(P>0.05)。3.Westernblot和RT-PCR结果显示：5-FU-PLA-O-CMC-NPS作用SW480后,与未加药对照组相比,P21 WAF/CIP、cyclinD1、Rb0的表达变化与药物具有剂量-时间依赖性：P21WAF/CIP、RbO表达随5-FU-PLA-O-CMC-NPS作用浓度增强、作用时间延长而增加；cyclinD1的表达随5-FU-PLA-O-CMC-NPS作用浓度增强、作用时间延长而降低。结论1.5-FU-PLA-O-CMC-NPS对人结肠癌细胞株SW480具有增殖抑制作用。月5-FU-PLA-O-CMC-NPS的制备及释放对5-FU抑制肿瘤的效应无影响,且与5-FU相比,SW480细胞增殖抑制作用起效慢而持续时间长,具有良好的缓控释特性。2.5-FU-PLA-O-CMC-NPS抑制SW480细胞增殖的主要机制为G1／S细胞周期阻滞。3 5-FU-PLA-O-CMC-NPS对SW480细胞增殖抑制作用机制不依赖野生型P53途径,通过上调细胞周期中G1／S期关键调控因子P21WAF／CIP表达,介导Cyclin家族的快速降解及上调Rbo发挥细胞周期阻滞作用。