环境中许多物理或化学因素可破坏头发角蛋白的主要构成成分胱氨酸,使其结构中二硫键发生断裂转变为含巯基的半胱氨酸。本文采用对巯基敏感的荧光探针——4-氯-7-硝基苯并恶二唑（NBD-Cl）与头发表皮的蛋白质巯基相结合而产生荧光的方法,来表征受损头发中的巯基。采用超景深显微镜和荧光显微镜直接观察NBD-Cl在头发表面的吸附与分布,并对NBD-Cl吸附过程进行考察。在此基础上,采用荧光光谱法对头发表面半胱氨酸进行荧光光谱分析并对反应的影响因素作探讨。此外,研究了罗丹明B和亚甲基兰两种荧光探针在头发表面的吸附情况。主要结论如下:（1）与对照发样相比较,冷烫发样横断面产生高亮度的荧光环,表明NBD-Cl分子是沿着表皮鳞片边缘和细胞膜复合体（CMC）区域浸入头发内部的。（2）以激发波长λ_EX420nm对头发作荧光光谱扫描,结果经NBD-Cl处理的冷烫发样荧光光谱图出现一强发射峰λ_EM515nm。说明NBD-Cl能特异性地与头发产生的巯基结合。（3）通过研究反应体系pH值、温度及时间等条件对NBD-Cl与头发巯基反应的影响,发现pH4.5、反应温度40℃、时间50分钟为最佳的反应条件。（4）罗丹明B和亚甲基兰两种荧光剂在头发表面的吸附量随着荧光剂浓度的增大而增大,直到达到吸附平衡。