桂利嗪(cinnarizine,1-双苯甲基-4-反式肉桂基哌嗪)为钙通道阻滞剂,系扩张脑血管周围血管的药物,临床用于治疗脑动脉硬化和脑血栓、前庭功能失调、偏头痛等。通常给药剂量为每日20mg,因此血药浓度较低。桂利嗪及氟桂利嗪片剂口服后人血药浓度的测定方法主要有HPLC法(荧光或紫外法检测),还有采用薄层色谱法测定的,但是桂利嗪注射液这一新剂型的临床前药代动力学研究未见报道,本文的工作意在对这一新剂型的临床前药代动力学作一整体评价,以便为这一新剂型的开发提供参考依据。 本文采用蛋白沉淀、液液萃取和固相萃取三种生物样品的预处理方法,建立了反相高效液相色谱测定生物样品中的桂利嗪浓度的体内分析方法。色谱分离条件为：色谱柱Hypersil-ODS2 C18(5μm,250mm×4.6mm,大连依利特科学仪器有限公司);流动相为甲醇：水：冰醋酸：三乙胺(70:30:0.6:0.4),流速1ml/min;紫外检测波长为254nm;柱温25℃。生物样品的内源性物质及代谢产物均不干扰样品的测定,经方法学验证,本方法的色谱分离选择性好,在各自的生物样品浓度范围内,线性良好,准确度、精密度、灵敏度、专属性均符合临床前药代动力学研究要求。 以蛋白沉淀-反相高效液相色谱法研究SD大鼠尾静脉注射桂利嗪注射剂后的药代动力学过程。结果表明：高、中、低三个剂量的药时曲线相似,桂利嗪注射剂体内血药浓度消除快,个体差异较大,采用非房室模型估算SD大鼠体内药物动力学参数。三个剂量的AUC0～∞分别为58.43μg·min/ml,113.48μg·min/ml,169.56μg·min/ml,与给药剂量基本呈正相关。 以液液萃取-反相高效液相色谱法研究SD大鼠尾静脉注射桂利嗪注射剂后药物体内组织分布及排泄情况。研究表明：从总体上看桂利嗪在大鼠体内分布广,但是浓度均不高。其中在各个时间点肺中的浓度均最高,心、肝、脾、肾、胃、小肠次之,脑、睾丸、脂肪最少。但最后一个取样时间脂肪组织中药物浓度最高,说明药物在脂肪组织中有蓄积。桂利嗪注射剂静脉注射后原型药物排泄甚少,胆汁在24h内累积排泄量为给药剂量的0.55％,在48h内粪的累积排泄量为给药剂量的1.14％,尿的累积排泄量<给药剂量的0.02％。 以液液萃取液液萃取-反相高效液相色谱法研究Beagle犬静脉注射桂利嗪注射剂后药代动力学过程。结果表明：高、中、低三个剂量的药时曲线十分相似,桂利嗪注射剂在Beagle犬体内血药浓度消除快,个体差异较大,采用非房室模型估算Beagle犬体内药物动力学参数。三个剂量的AUC0～∞分别为79.145μg·min/ml,175.729μg·min/ml,329.216μg·min/ml,均与给药剂量基本呈正相关。 采用平衡透析法研究桂利嗪的血浆蛋白结合率。用HPLC法分别测定血浆及缓冲液样品中的药物浓度,计算药物的血浆蛋白结合率,结果表明桂利嗪的血浆蛋白结合率在85％以上,且无浓度依赖性。 本文针对桂利嗪SD大鼠体内代谢情况进行了初步研究,SD大鼠静脉注射给药后血浆样品经蛋白沉淀,尿液样品液液萃取、固相萃取三种预处理,LC/MS方法进行分析,对桂利嗪体内可能的代谢产物进行了初步推测。结果发现该药体内代谢物较多,其进入体内后先发生Ⅰ相代谢,生成了极性增大的Ⅰ相代谢产物,同时原型药物和Ⅱ代谢产物发生Ⅱ代谢,生成甲基化或葡萄糖结合物。