清燥救肺汤对肺炎支原体肺炎大鼠IL-2、TNF-α水平影响的实验研究

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目的:建立肺炎支原体肺炎(MPP)的大鼠动物模型,通过观察MPP大鼠肺组织病理学、IL-2、TNF-α水平,研究清燥救肺汤治疗MPP的作用机制,为其进一步临床应用提供实验依据。材料与方法:(1)MPP大鼠模型的建立:将60只大鼠随机分为模型组和对照组各30只,连续3日对模型组大鼠接种浓度为1×107CCU/mL的MP菌液0.2ml,同时对照组接种MP液体培养基0.2ml。在接种后第3、5、7、10、14天,分批处死两组大鼠,取其左肺进行肺组织病理检测计算病理评分,取其右肺肺泡灌洗液(BALF),用PCR法检测BALF中MP的阳性率,通过以上两种方法来鉴定模型建立是否成功。(2)清燥救肺汤对MPP大鼠治疗作用机制的研究:将120只大鼠随机分为正常组、模型组、清燥救肺汤组、罗红霉素组各30只,采用(1)中的方法,建立MPP模型。于造模后第1天开始,对清燥救肺汤组、罗红霉素组大鼠分别给予50mg/ml清燥救肺汤、13mg/ml罗红霉素灌胃,同时模型组、正常组大鼠给予生理盐水灌胃,每只2.5ml,每天一次,连续10天。在造模后第3、5、7、10、14天对各组大鼠分批取材,摘取大鼠眼球取其静脉血,用ELISA法检测IL-2、TNF-α水平;取大鼠右肺上叶做病理检测以计算肺组织病理评分,取大鼠右肺下叶用免疫组化法检测IL-2、TNF-α水平。结果:1.肺组织病理评分显示,模型组在造模后第3天开始逐渐增高,到造模后第10天达到最高,对照组无明显炎症改变;PCR结果显示,模型组支气管肺泡灌洗液中MP阳性率在造模后第3天开始逐渐升高,在第7天达到100%,对照组支气管肺泡灌洗液中MP为阴性,证实MPP的造模成功。2.肺组织病理评分:罗红霉素组、清燥救肺汤组分别在造模后第5、7天开始较模型组明显降低,差异显著(P<0.05);清燥救肺汤组与罗红霉素组在造模后第3、14天比较无明显差异(P>0.05)。3. IL-2水平检测:免疫组化显示,模型组于造模后第7天开始较正常组明显降低,差异显著(P<0.05);罗红霉素组、清燥救肺汤组分别于造模后第7、10天开始较模型组明显升高,差异显著(P<0.05);各天数两治疗组间比较无明显差异(P>0.05)。ELASI检测显示,模型组于造模后第3天开始较正常组明显降低,差异显著(P<0.05);罗红霉素组、清燥救肺汤组分别于造模后第5、7天开始与模型组比较明显升高,差异显著(P<0.05);两治疗组在造模后第3、10天比较无明显差异(P>0.05)。4. TNF-α水平检测:免疫组化显示,模型组于造模后第7天开始较正常组明显升高,差异显著(P<0.05);罗红霉素组、清燥救肺汤组分别于造模后第7、10天开始较模型组明显降低,差异显著(P<0.05);各天数两治疗组间比较无明显差异(P>0.05)。ELASI检测显示,模型组于造模后第3天开始较正常组明显升高,差异显著(P<0.05);罗红霉素组、清燥救肺汤组分别于造模后第5、7天开始与模型组比较明显降低,差异显著(P<0.05),两治疗组在造模后第3天比较无明显差异(P>.05)。结论:1.清燥救肺汤可减轻MPP大鼠肺组织炎症,其作用在MP感染后期最明显。2.清燥救肺汤治疗MPP的作用机制可能与调节参与免疫炎症反应的细胞因子IL-2、TNF-α水平有关。
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