女性盆腔脏器脱垂患者主韧带中松弛素及其受体mRNA表达的研究

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目的:  盆腔脏器脱垂(Pelvic Organ Prolapse,POP)为女性盆底功能障碍性疾病(PelvicFloor Dysfunction disease,PFD)的主要类型,多合并有压力性尿失禁(Stress Urinarylnconntinence,SUI)。关于POP的病因及发病机制有很多理论和学说,包括雌激素水平下降、腹内压增加、体重指数上升、盆腔手术史和遗传因素等。目前比较公认的为盆底支持系统功能薄弱所致,盆底支持系统主要包括盆底横纹肌支持系统和盆底结缔组织。盆底结缔组织是指含有胶原、非胶原蛋白、粘多糖和弹性蛋白的一类组织,主要由韧带和筋膜构成,这些结缔组织将盆腔器官、盆底肌肉和骨盆连接为一个整体,在维持盆腔器官的正常结构和形态功能方面起着非常重要的作用。当盆底组织发生退化、损伤、发育不良或其他疾病时,盆底结缔组织代谢及功能紊乱,引起其张力减低,支持功能减弱,使盆腔器官发生移位,从而发生盆腔脏器脱垂。松弛素对结缔组织的作用主要在细胞外基质,通过与其受体耦联促进组织间质胶原和其他蛋白的分解,对维持结缔组织稳态起重要作用。本实验通过研究主韧带中松弛素(RLx)及其受体(LGR7) mRNA的表达,进一步揭示RLx及LGR7与POP的关系。  方法:  一、标本收集  收集2013年1月-2013年9月盛京医院妇科盆底病房收治的因盆腔脏器脱垂行全子宫切除术患者子宫主韧带组织40例,根据国际尿控协会公布的POP-Q分期法,均为脱垂Ⅲ-Ⅳ度患者,患者年龄48-57岁,平均年龄(50.14±3.18)岁。同时收集因子宫肌瘤等妇科良性病变行全子宫切除术患者子宫主韧带组织40例为对照组,患者年龄46-56岁,平均年龄(48.86±4.32)岁。  二、应用实时定量PCR对病例组和对照组主韧带RLx及LGR7mRNA表达量进行检测  按Trizol试剂盒步骤说明书提取细胞总RNA,后合成cDNA。实时定量PCR在ABI7500上进行,反应体系为20μl。PCR反应条件为:在95℃10秒解链后,95℃5秒,60℃20秒,72℃20秒,进行45个循环,再于72℃延伸7min。反应条件同时检测GAPDH表达水平。以GAPDH表达作为内参标定基因表达量  结果:  1、病例组主韧带中RLxmRNA表达与对照组相比显著增高,差异有统计学意义。(P<0.05)。  2、病例组主韧带中LGR7mRNA表达与对照组相比显著增高,差异有统计学意义。(P<0.05)。  结论:  POP患者主韧带中RLx及LGR7mRNA表达较对照组显著增高,提示RLx及LGR7在主韧带中的表达在POP的发病过程中发挥一定作用。
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