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人参、西洋参和三七系五加科人参属药材中的三种重要代表,其主要有效成分均为达玛烷型人参皂苷。大量研究结果表明:皂苷类化合物具有较强的生物活性,因此,对于人参皂苷的研究和开发具有重要的理论意义和实际应用价值。(1)分别采用回流、超声和温浸提取法对人参、西洋参和三七中的皂苷类化合物进行了分离提取对比研究,并应用高效液相色谱法(HPLC)对皂苷类化合物进行定量分析,对比研究表明超声提取法快速、安全、简便、成本低且不破坏成分,在此基础上,采用超声提取法对三种药材中的皂苷类化合物进行大量的分离提取,总皂苷粗提物应用高速逆流色谱技术进行分离纯化研究。(2)本文采用高速逆流色谱技术(HPCPC)和蒸发光检测器(ELSD)的联用技术对皂苷类化合物进行分离纯化,建立了HPCPC-ELSD法分离五加科人参属中药的皂苷类化合物的新方法。采用乙酸乙酯-正丁醇-水(1:1:2,v/v/v)为溶剂体系,经一次分离从三七总皂苷粗提物中分离纯化得到三七皂苷R1,人参皂苷Rg1、Re和Rb1;采用乙酸乙酯-正丁醇-水(1:1:2,v/v/v)为溶剂体系,从西洋参总皂苷粗提物中分离得到了Re、Rb1和Rc;采用乙酸乙酯-正丁醇-水(0.8:1.2:2,v/v/v)为溶剂体系,从人参总皂苷粗提物中分离得到了人参皂苷Rb1和Rb2两种单体皂苷。应用HPLC-ELSD技术对分离得到的皂苷类化合物进行分析,通过与已知化合物的保留时间相对比,进行定性分析;根据其峰面积百分比,确定其纯度均在95%以上。应用电喷雾串联质谱(ESI-MSn)进一步确定化合物的结构。结果表明,应用HPCPC-ELSD从中草药粗提物中分离无紫外吸收或者紫外末端吸收的活性物质是一种高效可行的分离技术,HPLC-ELSD和MSn为皂苷类化合物纯度检验和鉴定分析提供了较好的分析方法。(3)以人参、西洋参和三七的回流、超声和温浸提取的皂苷类化合物为研究对象评价其抗氧化活性。首次采用Photochemi-luminescence (PCL)抗氧化活性体外评价体系为分析平台系统考察皂苷类化合物的抗氧化活性,并利用DPPH法进行对照评价。结果表明:三七总皂苷,超声提取物抗氧化能力最佳,在PCL法中相当于2.53 nmol Vc,在DPPH法中其清除率为32.57%,其总皂苷含量为209.62 mg/g;回流提取物1.71 nmol、30.82%,总皂苷128.97 mg/g;温浸提取物1.07 nmol、18.60%,总皂苷100.44 mg/g,其抗氧化能力和皂苷含量呈量效关系。对于西洋参和人参总皂苷,超声提取物皂苷含量最高(73.27 mg/g和17.48 mg/g),依次为回流(52.26 mg/g和10.42 mg/g)和温浸提取物(48.62 mg/g和9.89 mg/g);但在抗氧化实验中,回流提取物清除自由基能力(2.28 nmol和23.62%,0.63 nmol和22.98%)比超声提取物强(2.18 nmol和23.51%,0.61 nmol和21.20%),但两者相差不大;温浸提取物抗氧化能力最低(1.07 nmol和18.60%;0.42 nmol和14.37%),其抗氧化能力和皂苷含量间存在一定差异。