第一部分:人胎儿骨髓间充质干细胞分离纯化及其生物学特性的研究目的体外分离、培养人胎儿骨髓间充质干细胞(FMSCs),并观察其生物学特性,建立稳定的FMSCs体外培养扩增体系。方法取4个月胎龄的流产胎儿,无菌条件下分离胎儿四肢骨,PBS冲洗骨髓腔;采用Ficoll法分离胎儿骨髓腔冲洗液,离心后取单个核细胞层培养、扩增、传代,观察细胞的形态,采用MTT法观察细胞生长曲线及分裂指数曲线,研究其增殖及生长特征;应用流式细胞术测定FMSCs表面标记,并观察细胞生物学特性。结果接种2天后,贴壁细胞呈梭形、多角形、成纤维细胞样形态。10天后开始传代,传代培养的潜伏期为24-36h,对数增殖期约为2-3天,第6天进入平台期。传代至15代后生长速度变慢;FCM检测显示,细胞高表达CD29、CD44及CD49e分子,低表达CD106、CD54、CD11b,而不表达CD34。结论采用Ficoll密度梯度离心、贴壁筛选法及单克隆培养法可以分离、培养、扩增出较均一的FMSCs,形态单一、生长稳定、增殖性较强,可以用于细胞治疗的进一步研究。第二部分:骨髓间充质干细胞促进急性皮肤放射损伤的修复目的:探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对皮肤局部急性放射损伤的修复作用。方法:雄性昆明小鼠46只(25g±2g),随机选取40只以3.6%水合氯醛腹腔麻醉,以能量为4MeV的电子线(1 Gy/min)照射小鼠臀部皮肤,面积为2 cm×1.5cm,总吸收剂量为40Gy,后将小鼠随机分为实验组和对照组各20只。实验组照射后即刻经尾静脉注射经CFDA SE标记的MSCs(2×10~7 0.1ml),对照组注射等量生理盐水,剩余6只不做照射处理,仅经尾静脉注射等量MSCs。观察实验组及对照组小鼠创面损伤情况及皮肤病理变化,免疫组化分析皮肤新生血管,观察MSCs在皮肤中的分布情况、了解MSC在皮肤Ⅲ°放射损伤的修复中的作用。结果:将MSCs经尾静脉移植入实验组小鼠后,实验组皮肤创面愈合速度比对照组快4～6天。实验组创面损伤面积较对照组小,病理表现中表皮、毛囊、皮脂腺及胶原纤维的损伤程度均较同时期的对照组小鼠轻。实验组MSCs在皮肤及其他组织中广泛分布且数量明显高于未照射的小鼠;皮肤创面中的新生毛细血管数高于对照组。结论:MSCs对局部皮肤放射损伤创面有明显有效的修复作用,其作用是在干细胞与创伤局部微环境相互作用下实现的。