白癜风外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞水平与自体表皮移植联合光疗的关系及用激光共聚焦扫描显微镜的观察

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背景白癜风是一种常见的多发性色素脱失性皮肤病,全世界发病率约0.5%-2%,近年来发病有增多趋势。临床表现为局部或者泛发性白斑,因其影响美容,给病人造成很大的心理压力。白癜风的确切发病机制尚未完全阐明,目前有多种假说。其中自身免疫学说受到越来越多的关注。CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+ Treg)是目前研究的热点,大量的研究提示,CD4+CD25+Treg细胞的数量减少或功能异常均可能导致自身免疫性疾病的发生。白癜风也是一种自身免疫性疾病,但是目前国内外尚缺乏此方面的研究。白癜风的治疗目前仍较困难,所有非外科疗法均应长期坚持,这些疗法易引起不良反应,如补骨脂素及其衍生物等光敏药物,易引起红肿、水疱;外用皮质类固醇易发生皮肤萎缩,自体表皮移植治疗的疗效虽然受多种因素影响,但国内外文献证实这种技术是一种简便、安全、可靠、使用无明显不良反应的治疗方法,目前已广泛用于临床,疗效肯定。UVB的生物学作用机制是刺激黑素细胞产生更多的黑素和迁移,自体表皮移植联合NB-UVB可以提高光疗的疗效。皮肤激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)是基于光学共聚焦原理的皮肤定位、在体、实时、动态三维计算机断层成像技术,是近年来最具有临床应用价值的无创性皮肤影像学技术。目的研究白癜风患者自体表皮移植联合NB-UVB治疗的疗效与外周血中CD4+CD25+ Foxp3+调节性T细胞百分率的变化,分析光疗对其改变的影响;同时用CLSM观察两次移植前后的白斑区及正常对照的变化,观察皮肤黑色素生长情况。研究对象与方法安徽医科大学杭州临床学院杭州三院皮肤科门诊2008年9月-2009年1月期间的白癜风自体表皮移植患者43例。设立移植后联合NB-UVB照射组20例,与非照射组23例。收集照光组患者照光前后外周血。选用单位体检正常者19人为正常对照组,收集其外周血。用流式细胞仪直接免疫荧光检测NB-UVB治疗前后的20例白癜风患者及19例正常人外周血CD4+CD25+调节性T细胞转录因子Foxp3+百分率,用皮肤激光共聚焦扫描显微镜观察移植前后及照射NB-UVB前后皮肤黑色素含量及形态变化,并用数码相机记录移植前后照片。用卡方、t检验比较两组数据之间的差异,秩和检验比较多组数据间差异。结果①NB-UVB照射可提高自体表皮移植的显效率、总有效率。非照光组移植联合光疗有效率为82.98%,照光组1次移植有效率为89.92%,2次有效率为95.52%,与非照光组比较,疗效差异分别不显著,显著(χ2=3.07,p>0.05,χ2=11.12,p<0.05)。其疗效与照射次数,色素出现时间等密切相关。②稳定期白癜风患者接受照光前的CD4+CD25+ Foxp3+调节性T细胞百分率与正常人相比无显著差异,联合NB-UVB治疗后的白癜风患者CD4+CD25+ Foxp3+调节性T细胞百分率较照光前明显增加,与照光前相比有显著性差异,与正常组相比差异无显著性。③20例患者中15例照光3次后移植边缘白缝缩小,色素加深。CLSM观察移植皮肤的黑色素环逐渐接近正常。结论CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞可能在白癜风发病中起一定的作用,NB-UVB光疗可能通过调节免疫功能来促进皮肤黑色素生成。NB-UVB可以提高移植的有效率,改善移植的美观度。应用皮肤激光共聚焦显微镜可以直观的观察到移植联合光疗的黑素变化。
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