TGF-β/Smads信号通路在脊髓损伤后胶质瘢痕形成中的作用及影响

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目的通过应用Decorin干预大鼠急性脊髓损伤检测不同时间点GFAP、TGF-β1,Smad3和Smad7的表达及研究它们之间的关系,从而探讨TGF-β/Smads信号通路在脊髓损伤后胶质瘢痕形成中的作用及影响。方法雌性SD大鼠90只。随机分为假损伤组:只打开椎板,不打击脊髓(假手术组)、单纯脊髓损伤组(对照组)、脊髓损伤+Decorin干预组(干预组),每组各30只,其中对照组和干预组按改良Allen’s法制作大鼠急性脊髓损伤模型,各组分别于伤后各时间点进行BBB评分,评分后处死大鼠取材,HE染色、GFAP、TGF-β1,Smad3和Smad7免疫组化染色及光镜下观察、计算GFAP阳性细胞面积及TGF-β1,Smad3和Smad7显色指数。分别对对照组及干预组各时间点阳性细胞面积及显色指数进行组间、组内比较,并对对照组GFAP阳性细胞面积与TGF-β1和Smad7显色指数及TGF-β1与Smad7之间进行相关性分析。数据用SPSS16.0统计软件进行分析。结果BBB评分结果:对照组及干预组在各时间点评分比假手术组明显降低(P<0.05);在伤后5d及之后的各个时间点,干预组大鼠BBB评分明显高于对照组(P<0.05),其中14d、28d相比具有显著性差异(P<0.01)。GFAP免疫组化结果:假手术组各时间点均有低水平的表达;对照组GFAP在大鼠脊髓损伤区及其损伤周围高表达,7d及14d最明显,28d有所减小;干预组各时间点GFAP表达较对照组明显减少(P<0.01)。TGF-β1、Smad3和Smad7免疫组化染色结果:在假手术组中TGF-β1、Smad3呈弱阳性表达,对照组,1d即出现TGF-β1、Smad3的表达明显增强,5d、7d时基本达到高峰,干预组各时间点TGF-β1、Smad3表达较对照组明显减少(P<0.05),其中在伤后1d、5d、7d及28d两组有显著性差异(P<0.01);Smad7在假手术组中强阳性表达,假手术组Smad7显色指数均明显大于对照及干预组(P<0.01)。对照组,Smad7于1d即出现较高的表达,随后逐渐减少,7d时基本达到低谷,14d后稍微升高,干预组各时间点Smad7表达较对照组明显增加(P<0.05),其中在伤后3d、7d、14d及28d有显著性差异(P<0.01)。将对照组各时间点GFAP阳性细胞面积与TGF-β1、Smad7显色指数进行相关性分析得知,与TGF-β1之间呈正相关(r=0.74202,P<0.01),与Smad7之间呈负相关(r=-0.86,P<0.01)。其中TGF-β1与Smad7两者之间也呈负相关(r=-0.5928,P<0.01)。结论①脊髓损伤后GFAP表达升高,胶质瘢痕明显增生。②Decorin能抑制GFAP的表达,从而减少脊髓损伤后瘢痕的增生,有利于促进神经功能的恢复。③脊髓损伤后瘢痕的多少与TGF-β1,Smad3和Smad7表达的量成比例关系:与TGF-β1,Smad3成正比例关系,与Smad7成反比例关系。④TGF-β/Smads信号通路在脊髓损伤后胶质瘢痕的形成中有着重要的作用及影响。
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