人源抗戊型肝炎病毒基因工程抗体的研究

来源 :中国预防医学科学院 中国疾病预防控制中心 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jc85858958
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戊肝病毒属于杯状病毒科,为无包膜负链RNA病毒,引起人戊型肝炎.在该文中,我们首次报道了运用噬菌体抗体库技术获得人源抗戊肝病毒基因工程抗体Fab段基因及表达并对其进行了检测.我们首先从自然HEV发病后60天左右的人体中抽取外周血,分离淋巴细胞,提取细胞总RNA,采用Oligo-dT引物逆转录合成cDNA,用一组人IgGFab特异性引物,通过PCR方法扩增出一组轻链和重链Fd片段基因.用原核表达戊肝病毒ORF2蛋白筛选上述噬菌体库,经过4轮筛选,获得12株Fab表达和抗原结合均为阳性的克隆,通过序列比较分析,最终确定为5株有效克隆.人源抗戊肝病毒基因工程抗体Fab段基因的获得、原核表达和鉴定为构建人源抗戊肝病毒全抗体打下良好的基础,并为进一步研究戊肝暴露后治疗及高危人群预防的戊肝单抗制剂奠定了基础,同时也为研究戊肝病毒的体内致病机制提供了条件.
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