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本文综述了国内外有关提取茄尼醇的各种方法。在前人研究的基础上,进一步探讨和研究茄尼醇的提纯方法,制定了合适的实验方案,提出了采用动态皂化萃取-结晶-柱层析相结合的方法提取茄尼醇。
在课题组前期实验工作的基础上,改进实验方案,使皂化和萃取反应同时进行,减少了实验步骤,提高了实验效率,详细研究了石油醚用量、皂化萃取时间和温度对实验过程的影响,采用最小二乘法对实验数据进行关联和比较。实验结果表明,5.0g粗品茄尼醇在45℃时加入50mL乙醇、2.5g氢氧化钠和50mL石油醚,搅拌反应2h,调节溶液的pH值为7,得到了58%茄尼醇。
设计了球形夹套式萃取结晶装置,针对得到的58%茄尼醇,选择以甲醇作为结晶剂,采用深冷结晶法提取更高纯度的茄尼醇。考察了结晶剂的用量、结晶温度、结晶时间和抽滤时间对结晶过程的影响,采用最小二乘法关联,设计了正交试验进行优化。实验结果表明,在结晶溶剂比为60、结晶温度为-3℃、结晶时间为4h、抽滤时间为20min的条件下进行深冷结晶,可将茄尼醇含量提高到80%以上。
设计了连续中压柱层析分离装置,对于得到的80%茄尼醇,选择以硅胶作为固定相,一定比例的石油醚和乙酸乙酯作为流动相,采用硅胶柱层析法来提取茄尼醇产品。考察了流动相的比例、硅胶目数及用量等因素对实验过程的影响,采用最小二乘法对实验数据进行关联和比较。实验结果表明,在固定相为200-300目的硅胶、流动相为石油醚:乙酸乙酯=9:1的条件下,0.6g的层析原料,通过装柱量为120g的硅胶柱,最后再通过重结晶,得到了含量为95%的茄尼醇产品。
本文所采用的分离方法简单,提取过程能耗低,95%的茄尼醇产品为进一步制备其它生物产品提供了原料。