自21世纪以来,能源危机已经成为人类关注的热点。一次性能源日益枯竭,可再生能源作为代替品在未来的能源利用中占有举足轻重的地位。其中,燃料乙醇项目是可再生能源的典型代表。燃料乙醇主要是通过木质素、淀粉等多糖转化的方式获得。α-淀粉酶能高效切开淀粉分子内部的α-1,4糖苷键,产生糊精、麦芽糖、低聚糖和葡萄糖。开启了淀粉乙醇生物转化的第一步。目前,淀粉酶主要从细菌、真菌等微生物中获得。相比其他微生物,链霉菌分布广泛,高山深海酷热极寒处都有分布。这些极端环境造就了链霉菌来源的淀粉酶有着其他来源所不能比拟的优势,这些优势让链霉菌来源的淀粉酶更能适应工业化的需求,对链霉菌来源的淀粉酶的应用将会更加广泛。本研究从土壤中分离淀粉水解能力较强的链霉菌,从系统生物学的角度研究,采用比较蛋白组学技术对淀粉刺激下链霉菌胞内蛋白的表达变化进行研究,寻找与淀粉酶合成相关的关键调控因子。用平板涂布和划线分离等方法,一共分离到35株放线菌。通过冷藏法使淀粉老化,测量了水解圈和菌落直径,通过分离得到水解能力较强的链霉菌,命名为D227,其水解圈半径与菌落半径比值为4.51±0.71。将经过扩大培养的菌体接种于不同碳源的培养基,监控培养液中淀粉含量动态变化。选取淀粉含量急剧减少阶段的菌体用于胞内蛋白的提取,进行比较蛋白组研究。经过蛋白双向电泳的分析,得到了高重复性蛋白双向电泳图谱,得到大约1700个重复性好的蛋白点。通过ImageMaster软件分析发现,有84个蛋白点发生显著变化(P<0.05),其中43个蛋白点只在一种实验处理中出现。利用MALDI TOF MS技术对选取的蛋白点进行了质谱鉴定,鉴定成功12个蛋白点,其中包括6个在淀粉处理中特异表达的蛋白点,其余6个蛋白点在两种处理中的表达量发生显著变化(P<0.05)。通过Blast2Go软件分析发现氨基酸转运酶、支链淀粉酶、DNA甲基化酶、羧基端蛋白酶在淀粉处理下特异表达。相对于葡萄糖处理,二氢硫辛酸脱氢酶、酰基磷酸酶、腺苷脱氢酶表达量下调；醛缩酶的表达量上调。本研究以从土壤中筛选得到的淀粉水解能力较强的链霉菌D227为研究对象,通过比较蛋白组学技术研究链霉菌淀粉酶合成与分泌过程中蛋白的表达差异,获得一批可能参与链霉菌淀粉酶合成的关键调控因子,为进一步开展与链霉菌淀粉酶合成相关研究提供了数据资料。