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近年来，纳米型发光材料倍受人们的关注，并作为发光探针应用于各种生物检测中。与传统的有机染料相比，发光纳米粒子的发光性能更强、稳定性更高。为方便对纳米粒子进行表面修饰，通常制成核壳型纳米粒子，其中SiO2纳米粒子因有良好的水溶性，易于制备、分离和表面修饰，应用较多。但对多数染料和其它小分子配合物，在SiO2中直接掺杂时荧光物质很易从SiO2纳米粒子中泄漏出来；而且在溶液体系中，由于溶剂分子对荧光物质猝灭的影响，使荧光物质的发光效率受到很大影响。 本论文利用化学作用制备了一系列避免了荧光物质泄漏、粒径30-50nm、大小均匀的荧光纳米粒子，并利用荧光物质包壳的方法减少了荧光猝灭及光漂白现象，结合纳米技术、生物技术、荧光标记技术，建立了一种基于生物荧光纳米颗粒的新型荧光标记方法。 第二章以荧光染料丹磺酰氯与3-氨丙基三乙氧基硅烷（APTEOS）反应形成的前驱物为核，二氧化硅为外壳制备了大小均匀的荧光纳米颗粒，利用丹磺酰氯与APTEOS及硅壳之间稳定的化学键，解决了荧光染料泄漏问题。由于磺酰氯染料种类少，应用范围受到限制。第三章用氨基多羧酸的双酸酐化合物二乙三胺五醋酸酐（DTPAA）与氨基荧光素及APTEOS偶联，形成掺杂前驱物，合成了不泄漏的荧光素掺杂的纳米颗粒。稀土离子或其配合物在掺杂时也存在严重的泄漏，第四章用对氨基苯甲酸与DTPAA及APTEOS反应得到配体，进而制成纳米粒子，然后将其浸泡在TbCl3溶液中得到稀土配合物掺杂的荧光纳米粒子，利用配体与硅壳间的化学键作用及DTPAA对铽的强配位作用解决了泄漏问题。第五章中应用这一新型的荧光标记方法，用荧光素纳米粒子成功的测定了人IgG（hIgG），荧光强度的大小与待分析物hIgG的浓度成正比，在0.1-250ng／ml之间有较好的线性关系，检测限为0.05ng／ml。与直接用荧光素进行标记相比，灵敏度有了很大的提高。与传统的荧光标记方法比较，该方法在稳定性、灵敏度、应用范围等方面都有重要的突破。