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目的:探讨AMD3100通过CXCR4/β-catenin信号通路对中枢性神经干细胞增殖、迁移和分化的抑制作用。方法:1、悬浮法培养中枢神经干细胞,配制含AMD3100不同浓度梯度(0ug/L,40ug/L,80ug/L,160ug/L,320ug/L,640ug/L和1000ug/L)的培养基培养神经干细胞。分别在2小时、24小时、48小时、72小时用CCK8法检测各浓度梯度OD值,再分别计算各时间时的增殖抑制率。2、根据前一步AMD3100抑制中枢神经干细胞增殖实验结果选择最适药物浓度为80ug/L和最佳作用时间为48小时。分别培养对照组(0ug/L)和AMD3100组(80ug/L)中枢神经干细胞48小时,划痕实验检测细胞迁移能力的变化,Western Blot检测神经干细胞标志物Nestin、神经元细胞标志物β-tubulin、Wnt、β-catenin和β-catenin(P-Tyr489)的表达情况。结果:1、CCK8法检测结果:各浓度梯度的AMD3100作用于神经干细胞后,随着时间的延长,80ug/L,160ug/L,320ug/L,640ug/L和1000ug/L各浓度下增殖能力逐渐降低,抑制率逐渐增高,在48小时和72小时,增殖能力均极显著低于0ug/L,差别具有统计学意义(P<0.01),抑制率均达到50%以上;40ug/L浓度时增殖能力与0ug/L相比无明显差异(P>0.05)。在2小时和24小时,随着浓度的增加各浓度梯度抑制率逐渐增加;在48小时和72小时160ug/L,320ug/L和640ug/L抑制率呈增加趋势,均低于80ug/L和1000ug/L,均高于24小时各浓度梯度抑制率。2、划痕实验结果:在48小时AMD3100组细胞迁移面积百分比为(19.80%±1.83),明显低于对照组(32.92%±2.64),差异具有统计学意义(P<0.05)。Western Blot检测48小时AMD3100组Nestin、β-tubulin、β-catenin和β-catenin(P-Tyr489)的表达量均低于与对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组Wnt的表达量无明显差异(P>0.05)。结论:1、AMD3100抑制中枢神经干细胞的增殖具有时间和浓度依赖性。2、AMD3100抑制SDF-1/CXCR4轴可以抑制中枢神经干细胞的迁移和分化能力。3、AMD3100可能是通过CXCR4/β-catenin通路抑制中枢神经干细胞的增殖迁移和分化。