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背景和目的通过对大鼠MCAO模型缺血脑组织及下调脑区的DTI成像评价,探讨其与RGMa蛋白表达的相关性,并进一步探讨丁苯酞下调缺血脑组织及下调脑区RGMa的表达,促进轴突再生,从而改善大鼠的神经功能恢复及其影像学表现。材料与方法1、将140只健康雄性SD大鼠,随机分为以下四组:假手术组、MCAO模型组、生理盐水组及丁苯酞组,每组35只。线栓法制作MCAO模型。丁苯酞组,制作MCAO模型后腹腔注射丁苯酞药,给药剂量按80m g/kg计算;生理盐水组,给予相同体积的生理盐水。2、随机取SD大鼠20只,假手术组、MCAO模型组、生理盐水组和丁苯酞组每组5只,各组大鼠在造模成功后1h、3h、6h、12h、24h进行磁共振检查和神经功能评分。磁共振扫描采用美国GE Discovery MR 750 3.0T超导高场磁共振扫描机,上海晨光大鼠专用线圈,动物固定于仰卧位,头先进,以视交叉为扫描中心,行轴位常规T1WI、T2WI、DWI、DTI等序列检查。分别计算病灶侧与小脑半球的ADC值、FA值。3、取SD大鼠60只,假手术组、MCAO模型组、生理盐水组和丁苯酞组每组15只,在大鼠MCAO模型后1h、3h、6h、12h、24h,Western blot法测定缺血脑组织、小脑半球的RGMa蛋白表达;另外60只(每组15只),取缺血脑组织及小脑半球行石蜡切片,进行免疫组化染色,观测RGMa蛋白和NF-200蛋白的表达。4、所有的数据均使用SPSS 17.0软件进行统计学处理,计数资料采用sx±记录。采用的检验方法有t检验,同一组不同时间点采用重复测量方差分析,不同组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SLD检验,相关性分析采用Spearmen相关分析,检验水准为α=0.05,P<0.05表示差异有统计学意义。结果1、MCAO模型组、生理盐水组、丁苯酞组的改良的神经功能评分(Modified Neurological Severity Score,m NSS)均高于假手术组,且随着时间的延长,m NSS评分越高;在缺血后3h、6h、12h、24h时,丁苯酞组的m NSS评分较MCAO模型组降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。2、MCAO模型组、生理盐水组大鼠缺血后1h,缺血区ADC值、FA值开始降低,12h降至最低后有所升高;在缺血后3h、6h、12h、24h时,丁苯酞组缺血区ADC值、FA值较MCAO模型组升高,差异有统计学意义。MCAO模型组、生理盐水组大鼠小脑半球缺血后1h后,各个时间点ADC值、FA值较假手术组降低,均具有统计学差异(P<0.05);丁苯酞组大鼠小脑半球ADC值、FA值较MCAO模型组升高,在12h、24h两组间的ADC值差异有统计学意义;在3h、6h、12h、24h时间点两组间的FA值差异具有统计学意义(P<0.05)。3、MCAO模型组、生理盐水组大鼠缺血后,不同时间点缺血区的RGMa蛋白阳性表达均有所增加,呈棕黄色染色。局灶性脑缺血后RGMa蛋白表达逐渐增多,在12h表达量最多;丁苯酞组在相应时间点的RGMa蛋白的表达较MCAO模型组有所降低,在6h、12h、24h时间点差异具有统计学意义;小脑半球RGMa蛋白表达与脑缺血区变化类似,丁苯酞组在各个时间点的RGMa的表达较MCAO模型组降低,1h、3h、6h、12h时间点的差异具有统计学意义(P<0.05)4、MCAO模型组、生理盐水组大鼠缺血后3h,缺血区及小脑半球的NF-200蛋白阳性表达降低,呈棕黄色染色。随着时间延长,NF-200表达逐渐减少;丁苯酞组相应时间点的NF-200表达较MCAO模型组有所增加,在6h、12h和24h时间点两组间差异具有统计学意义(P<0.05)。5、各手术组大鼠的m NSS神经功能评分与缺血性脑梗死核心区FA值呈负相关,与RGMa蛋白表达存在正相关。结论1、脑梗死区脑组织RGMa表达上调参与大鼠脑功能神经功能损伤的发生。2、丁苯酞通过下调RGMa蛋白表达,促进脑梗死下调脑区的激活,发挥脑梗死后神经保护作用。3、磁共振DTI可以动态监测缺血性脑梗死大鼠下调脑区的改变及其治疗后变化。