铁皮石斛多糖的提取分离纯化、结构鉴定及其综合应用

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铁皮石斛为兰科属多年生草本植物。石斛应该是我国较早记载为养生品的中草药,而它的种类更是繁多。铁皮石斛就是此族中上品之一,主要是以石斛的茎入药,对消化系统和呼吸系统问题以及心率失调问题,铁皮石斛都有极好的治疗效果。因为铁皮石斛生长条件的苛刻,所以现在对其的研究还是主要以扩大培养的组培为主,而对一些药用价值的研究,查看了大量文献发现都是用云南产的铁皮石斛干品作为原材料,对于浙江源的铁皮石斛鲜品的研究鲜有报道。本文分成几个方面对铁皮石斛多糖进行了较为全面的研究:铁皮石斛多糖的提取及其抗氧化研究,铁皮石斛分级醇沉多糖的分离纯化及其初步的结构鉴定,铁皮石斛多糖的应用研究。铁皮石斛粗多糖经过分级醇沉后得到三个组分DOP30、DOP60及DOP80,通过抗氧化和多糖含量的多少选择DOP60和DOP80进行深入的研究。DOP60和DOP80通过DEAE Sapharose fast flow阴离子交换柱与Sephacryl S系列凝胶柱的分离纯化后,得到两个纯化组分:DOP60A和DOP80A。经HPLC检测均为均一多糖组分,且平均分子量分别为1.3×104Da和1.2×104Da。通过紫外全扫描,结果显示两者均不含核酸和蛋白质。利用红外光谱分析DOP60A,通过分析应含有葡萄糖和甘露糖的特征吸收峰,样品甲基化后,GC分析证明DOP60A的单糖组成为葡萄糖和甘露糖。利用GC-MS分析及NMR谱(1H NMR、13C NMR及2D NMR)分析深入解析DOP60A的结构。由NMR分析得到DOP60A是线性链式结构是以→4)-β-D-Glcp-(1→为主的重复结构。铁皮石斛多糖应用研究分为两个部分:铁皮石斛多糖抗肿瘤的初步研究和铁皮石斛多糖的烟草保润效果研究。通过研究发现铁皮石斛多糖对S180和A549都具有一定的抗肿瘤活性,毒理性研究是铁皮石斛多糖对正常细胞几乎无毒副作用;此外,铁皮石斛多糖对卷烟具有良好的保润性,且能提高卷烟吸食的舒适度,所以可考虑将其作为新型保润剂。
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