苦瓜花药培养诱导愈伤组织及器官分化的研究

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近年来由花粉花药培养产生了单倍体育种技术,大多数作物都开展了相关的离体花粉花药培养研究。在茄科、禾本科、十字花科植物上其研究和开发有了长足的进展。而在瓜类蔬菜作物上,研究较少,尤其是苦瓜花药培养至今未见有报道。本试验以雅安本地农产种植的大白苦瓜为材料,系统地研究了苦瓜花药培养的技术体系。初步探讨了苦瓜花药培养过程中花蕾的最佳取材时期,小孢子发育处于单核期时的花蕾外观形态,最佳愈伤组织诱导培养基及不定根分化培养基,并对不定根进行染色体观察,确定其倍性。试验结果如下:1、花蕾的取材时期:以大白苦瓜为材料的花药培养,最佳取材时期为5~7月的上午9~10点,天气以阴天为宜。2、小孢子发育处于单核时期的花蕾外观形态:未开花花蕾,花蕾长为8.5~10mm;横径为4~5mm;花萼微张开,花瓣露出部分<2mm;花瓣颜色绿色到淡绿色,可以微黄,但不能呈较多的黄色;花药颜色为淡黄色~黄绿色,花丝与花药比小于1/2。3、本试验采用16个激素组合,结合MS、N6、B5三种基本培养基,以及分别为3%和5%浓度的蔗糖、麦芽糖对苦瓜花药进行愈伤组织诱导。得到的最佳诱导培养基为:MS+BA 0.5mg/L+NAA 0.2 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L+KT 2.0 mg/L+蔗糖3%+琼脂0.8%。4、在22个花药器官分化培养基中,只有MS+K7 1.0mg/L+2,4-D 0.5mg/L+蔗糖3%+琼脂0.8%分化出了不定根。分化出不定根的愈伤组织呈白色松散状。5、细胞分裂素BA、KT在整个花药培养过程中必不可少,在配合使用NAA时能使花药愈伤组织得到很好的增殖。6、分化出的不定根染色体计数为2n=3x=33,为三倍体。
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