【摘 要】
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该实验构建了含有HSVtk基因的重组腺病毒载体Ad-HSVtk.即E1区和E3区缺失的腺病毒载体pBHG10与含有外源基因的Ψ穿梭质粒p△ElsplA-HYTK共转染腺病毒包装细胞293,通过二者在细
【出 处】
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北京医科大学 北京大学医学部 北京大学
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该实验构建了含有HSVtk基因的重组腺病毒载体Ad-HSVtk.即E1区和E3区缺失的腺病毒载体pBHG10与含有外源基因的Ψ<+>穿梭质粒p△ElsplA-HYTK共转染腺病毒包装细胞293,通过二者在细胞内的同源重组,获得该复制缺陷型的重组腺病毒.Ad-HSVtk在293细胞内扩增,产生的病毒上清用于感染靶细胞-人胃癌肝转移细胞系NCI-N87,经潮霉素B的筛选获得潮霉素B抗生细胞;通过RT-PCR检测,将TK阳性的胃癌细胞命名为NCI-N87-Ad-HYTK.通过RT-PCR检测,将TK阳性的胃癌细胞命名为NCI-N87-Ad-HYIK.该实验结合了腺病毒载体和HSVtk基因的众多优点,构建了重组腺病毒,进行了体外实验,为进一步的体内实验打下了良好的基础.
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